Calcitriol in combination with DL- Buthionine Sulfoximine induce alterations in growth, redox state and differentiation in neoplastic intestinal cells.

LIAUDAT AC, BOHL LP, TOLOSA DE TALAMONI NG, PICOTTO G

CORDOBA, ARGENTINA

Congreso; XXVII REUNION ANUAL DE AAOMM; 2010

AAOMM

El cáncer colorrectal es considerado un proceso multifacético caracterizado por  alteración de la proliferación celular, escape de la regulación del crecimiento por contacto, formación de estructuras adenomatosas y futuras transformaciones malignas. La incidencia y la prognosis de esta enfermedad, como así también del cáncer de mama, próstata y del melanoma, están en estrecha relación con los niveles plasmáticos de vitamina D3. En los últimos años se han descripto varias acciones no clásicas del metabolito activo de la vitamina D, el 1,25(OH)2D3, también denominado calcitriol. Entre ellas se destacan la modulación del crecimiento y la adhesión celular de varios tipos celulares benignos y malignos. Por otra parte, en cánceres resistentes a los tratamientos convencionales con radioterapia y quimioterapia, la inclusión de drogas oxidantes tal como D,L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO) aumenta la sensibilidad de las células neoplásicas a los tratamientos. El objetivo de nuestro trabajo fue determinar el efecto del calcitriol y BSO sobre la proliferación de las células de cáncer de colon y evaluar los posibles mecanismos involucrados. Para ello, las células Caco-2, derivadas de adenocarcinoma humano, se trataron con calcitriol (1-200 nM),  BSO (2-500 μM), con ambas drogas o su vehículo a distintos tiempos de exposición. La proliferación celular se determinó por la técnica de cristal violeta. La actividad de las enzimas del sistema antioxidante superóxido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT), como así también la enzima marcadora de diferenciación celular fosfatasa alcalina (FAL) y los niveles de glutatión (GSH) se midieron por espectrofotometría. Los resultados se analizaron estadísticamente mediante el test de ANOVA a una vía seguido del test de Bonferroni como post-hoc. Los resultados demuestran que tanto calcitriol como BSO inhibieron el crecimiento de las células Caco-2, efecto que resultó dependiente del tiempo y de la concentración de droga utilizada. El contenido total de GSH disminuyó a las 6 hs de tratamiento con BSO y con el tratamiento combinado. A las 96 hs se observó aumento en la actividad de FAL en las células tratadas con 1,25(OH)2D3  y con ambas drogas. La actividad de CAT aumentó sólo con el tratamiento combinado y la actividad SOD no se modificó. En conclusión, BSO incrementa el efecto antiproliferativo del calcitriol sobre las células Caco-2 mediante aumento del estrés oxidativo, el cual puede ser sólo parcialmente compensado por el sistema enzimático antioxidante. El incremento de FAL sugiere una inducción de la diferenciación celular. Este trabajo fue subsidiado por FONCYT, CONICET, MINCYT (Córdoba) y SECYT (UNC), Argentina. La Prof. Dra. Nori Tolosa de Talamoni y la Dra. Gabriela Picotto son miembros de la Carrera de Investigador Científico de CONICET.