ESTUDIO DE TRANSPORTADORES DE TRYPANOSOMA CRUZI COMO BLANCOS TERAPÉUTICOS CONTRA EL MAL DE CHAGAS: CARACTERIZACIÓN DE LA PERMEASA DE ARGININA.

SAYÉ, MELISA; MIRANDA, MARIANA; CAMARA, MARIA DE LOS MILAGROS; BOUVIER, LEÓN ALBERTO; PEREIRA, CLAUDIO

Buenos Aires, Argentina

Jornada; X Jornadas Científicas del Instituto Lanari; 2011

Introducción: Los organismos protozoarios adaptados al parasitismo fueron reemplazando a largo de su evolución rutas metabólicas de biosíntesis por sistemas de transporte de metabolitos esenciales. Como consecuencia, muchas vías metabólicas dependen únicamente de procesos de transporte, haciendo del transporte un mecanismo fundamental para la supervivencia del parásito. Trypanosoma cruzi cuenta con una familia numerosa de permeasas de aminoácidos denominada TcAAAP, muchos de cuyos miembros han sido previamente caracterizados. Un aspecto interesante de esta familia es que no se han encontrado miembros en mamíferos y a diferencia de lo que ocurre en la mayoría de los organismos, existen evidencias de que estos transportadores son mono-específicos. Objetivos: En este trabajo se propone validar al transportador de arginina TcAAP3 y confirmar la especificidad por este sustrato. A su vez se pretende estudiar la localización subcelular poniendo a prueba la hipótesis de que los miembros de la familia TcAAAP se encuentran ubicados en la misma región de la superficie celular, el bolsillo flagelar. Por último, se analizará la participación de este transportador en el metabolismo de arginina de este parásito. Resultados: Mediante la generación de parásitos transgénicos que sobre-expresan al transportador logramos validar al TcAAP3 como una verdadera permeasa de arginina que transporta específicamente arginina y no otro aminoácido básico como lisina. Por otro lado, mediante la fusión a proteínas fluorescentes pudimos establecer su localización en el bolsillo flagelar cerca del collar del bolsillo y más aún, determinamos su co-localización con el transportador de lisina TcAAP7 previamente caracterizado. Finalmente, observamos que el TcAAP3 actúa como un regulador del metabolismo de arginina ya que parásitos con un aumento significativo en el transporte de este aminoácido presentaron niveles disminuidos de la enzima arginina quinasa en la fase estacionaria de cultivo. Conclusión: El Mal de Chagas es una enfermedad que afecta millones de personas; la situación actual es especialmente crítica puesto que las terapias disponibles son escasas e ineficientes, por lo tanto la búsqueda de nuevos tratamientos es prioritaria en nuestro país. La importancia de los resultados obtenidos en el presente trabajo consiste en que estos transportadores podrían ser posibles blancos terapéuticos contra la enfermedad de Chagas puesto que toda esta familia se encuentra ausente en los hospedadores mamíferos. A su vez, la mono-especificidad para arginina encontrada para el TcAAP3 indica que el mismo podría ser utilizado como puerta de entrada selectiva para nuevas drogas tripanocidas.