TcNDPK1 y TcNDPK2, dos nucleósido difosfato quinasas de Trypanosoma cruzi

MIRANDA, MARIANA; BOUVIER, LEÓN ALBERTO; CANEPA, GASPAR; PEREIRA, CLAUDIO

Rosario, Argentina

Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP); 2008

Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias (SAP)

Las nucleósido difosfato quinasas (NDPKs) son enzimas que catalizan la transferencia de fosfatos de alta energía desde nucleósidos tri- a difosfato. Están involucradas en el mantenimiento del ?pool? de nucleótidos y fueron asociadas a muy diversas funciones celulares. En Trypanosoma cruzi reportamos la presencia de cuatro isoformas de NDPK, dos de las cuales (TcNDPK1 y TcNDPK2) fueron caracterizadas. TcNDPK1, la isoforma canónica, fue detectada en los estadíos tripomastigote y amastigote. Llamativamente, además de tener actividad fosfotransferasa es capaz de degradar ácidos nucleicos in vitro. Esta actividad es inespecífica y es comparable al de las nucleasas clásicas, incluso las comerciales. Se observó degradación de diferentes templados de ADN, tanto plasmídicos como genómicos. TcNDPK2, que contiene un dominio denominado DM10 en el extremo N-terminal, fue detectada en los tres estadíos del ciclo de vida del parásito. En epimastigotes su expresión aumenta durante la fase exponencial de cultivo y localiza principalmente en el flagelo de los parásitos. Una fusión del dominio DM10 a GFP mostró que este dominio es suficiente para dirigir a GFP al flagelo sugiriendo que este dominio es al menos en parte responsable de la localización flagelar de esta enzima. Por primera vez se reporta una NDPK de tripanosomátidos con actividad nucleasa (TcNDPK1), como así también una NDPK flagelar (TcNDPK2). Además, es la única función del dominio DM10, presente en NDPKs de diferentes organismos, reportada hasta el presente.