INVESTIGADORES
LORENZ Virginia
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación de una nueva técnica para tipificar sublinajes TcIId y TcIIe de T cruzi por PCR a partir de muestras biológicas
Autor/es:
VIRGINIA LORENZ; CRISTINA DIEZ; VERÓNICA GONZALEZ; MARGARITA BISIO; ALEJANDRO SCHIJMAN; ALDO SOLARI; IVÁN MARCIPAR
Lugar:
Rosario - Pcia. de Santa Fe
Reunión:
Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
En un trabajo previo hemos señalado la presencia de 2 secuencias mayoritarias características del sublinaje TcIId y una del sublinaje TcIIe. Estas secuencias se encuentran al menos 105 veces más representadas en los linajes en los que fueron identificadas que en los demás. Sobre esta base hemos propuesto una técnica de PCR semicuantitativa para identificar cepas de los sublinajes TcIId, TcIIe, o para descartar su presencia. Para esto realizamos una primera amplificación de las regiones hipervariables de los minicírculos (mHVR) del parásito a partir de ADN de la muestra con los primers S121 y S122 y luego sobre 0,3 pg de ADN de este primer producto amplficado, una segunda PCR con los primers específicos para amplificar las 3 secuencias mencionadas. En este trabajo evaluamos la técnica con un panel de 9 muestras ya tipificadas como TcIId por caracterización del miniexón y del ADN ribosomal y de 25 muestras ya tipificadas por hibridización con sondas de mHVR, de las cuales 21son TcIId, 2 son TcIIe y 2 son TcIIe+d. Todas las muestras evaluadas fueron coincidentes con los resultados previos. Luego se realizó mediante esta técnica la tipificación de 31muestras de pacientes provenientes de Bolivia y distintas regiones de la Argentina, los cuales resultaron ser todos portadores de cepas TcIId salvo para un caso que tampoco era TcIIe. Se discute además la posibilidad de subclasificar, con esta metodología, a las cepas TcIId. La ventaja de la técnica propuesta es que no requiere del aislamiento y cultivo de parásitos a partir de la muestra biológica, lo que puede resultar una baja sensibilidad para obtener el material necesario para tipificar o en la pérdida de cepas para las cuales estas condiciones son desfavorables.
