Oxidaciones fotosensibilizadas de nucleótidos púricos inducidas por pterinas de interés biomédico

MARIANA P. SERRANO; CAROLINA LORENTE; FAUSTINO E. MORAN VIEYRA; CLAUDIO D. BORSARELLI; ANDRÉS H. THOMAS

Córdoba

Congreso; II Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos; 2013

Universidad Nacional de Córdoba

La radiación UV-B (280-320 nm) daña al ADN a través de la absorción directa de radiación por las bases nitrogenadas.1 Por otra parte, la radiación UV-A y visible (> 320 nm) a pesar que no son absorbidas por las bases nitrogenadas pueden inducir modificaciones en el ADN a través de reacciones fotosensibilizadas. Esta acción indirecta está mediada por fotosensibilizadores exógenos o endógenos. Las pterinas forman parte de éste segundo grupo, dado que en enfermedades como el vitiligo, en donde existe un déficit de melanina y, por ende, una deficiente protección contra la radiación ultravioleta (UV), se acumulan en la piel compuestos reducidos y oxidados de esta familia,2 tales como 7,8-dihidrobiopterina (H2Bip), biopterina (Bip), 6-formilpterina (Fop) y 6-carboxipterina (Cap). Dentro de esta familia, se trabajó un grupo de tres pterinas oxidadas, Bip, y sus fotoproductos, Fop y Cap que son relevantes desde el punto de vista biomédico por ser productos de oxidación de la 5,6,7,8-tetrahidropterina (H4Bip), cofactor enzimático que participa en el metabolismo de aminoácidos.3 Por lo tanto, resulta de gran interés estudiar la capacidad fotosensibilizadora de estos compuestos frente a biomoléculas. En particular, los nucleótidos son sustratos adecuados para el estudio de reacciones fotosensibilizadas porque, aparte de estar presentes en la célula (principalmente formando parte del ADN) y ser blanco principal de reacciones fotoinducidas, son muy solubles en agua y se pueden cuantificar fácilmente por métodos cromatográficos.4 Para estudiar las reacciones de fotosensibilización se utilizaron como sustratos modelo dos nucleótidos púricos: 2′-deoxyguanosina 5′-monofosfato (dGMP), y 2′-deoxyadenosina 5′-monofosfato (dAMP). Con el objetivo de dilucidar los mecanismos involucrados en los procesos fotosensibilizados se realizaron experimentos tanto estacionarios como resueltos en el tiempo. En particular, aplicando análisis por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) se obtuvieron perfiles de concentración en experimentos de irradiación continua bajo distintas condiciones experimentales. Además se llevaron a cabo experimentos de Laser Flash Photolysis para estudiar la participación de especies excitadas e intermediarios de reacción radicalarios. A partir del análisis de los resultados se planteó un mecanismo general para los procesos fotosensibilizados estudiados.