LA TRANSFERENCIA DEL GEN IFN-B TIENE UN FUERTE EFECTO ANTITUMORAL POTENCIADO POR EL EFECTO BYSTANDER.

ROSSI UA, VILLAVERDE MS, GIL CARDEZA ML, GLIKIN GC Y FINOCCHIARO LME

Congreso; SAIC REUNIÓN LVI; 2011

Se denomina efecto bystander al fenómeno que extiende la citotoxicidad provocada por una terapia a las células del entorno que no fueron alcanzadas por dicha terapia. La lipofección con el gen IFN-B en células derivadas de melanoma canino (Ak, Bk, Ch) produce un fuerte efecto citotoxico (p≤0.001). Teniendo en cuenta las bajas eficiencias de lipofección resulta evidente que la muerte celular inducida por el gen cIFN-B no se restringe a las células que lo expresan. Para comprobar la existencia de efecto bystander en nuestro sistema, se realizaron cultivos bi- y tri-dimensiónales de diferentes diluciones de células lipofectadas con cIFN-B en cantidades crecientes de células lipofectadas con B-galactosidasa (B-gal), y se determinó si el efecto observado sobre la proliferación celular resultó ser igual o menor al efecto esperado por dilución. Por otro lado, se evalúo la capacidad del medio condicionado (MC) obtenido 24 h post-lipofeccion de causar citotoxicidad en células no lipofectadas. La viabilidad celular se determinó utilizando el método de la fosfatasa ácida. En Ak y Ch se observaron valores menores a los esperados en todas las diluciones, tanto en cultivos bi- como tri-dimensionales (p≤0.05); aún cuando se diluyó al 10% se conservó un gran efecto citotóxico (p≤0.001). En Bk el efecto de la dilución resultó bastante similar a lo esperado. En las tres líneas evaluadas el MC resultó altamente citotóxico (p≤0.001). El factor citotóxico presente en el MC demostró ser termo-lábil ya que al pre-calentar el MC por 30 m a 72ºC se perdió por completo el efecto citotóxico. Estos resultados mostraron un gran efecto bystander en las tres líneas estudiadas. Este efecto fue probablemente producido por la liberación al medio de cIFN-B y quizás otros factores. Este efecto constituye una condición sine qua non para la propuesta de la lipofección del gen cIFN-B como una posible terapia génica, dado que in vivo no es posible llegar al 100 % de las células tumorales.