EFECTOS DEL TRATAMIENTO COMBINADO CON EL GEN DEL CIFN-BETA Y BORTEZOMIB O DICLOROACETATO SOBRE LÍNEAS CELULARES DE MELANOMA CANINO. ESTUDIOS IN VITRO.

ROSSI UA, VILLAVERDE MS, GIL CARDEZA ML, GLIKIN GC Y FINOCCHIARO LME

Mar del Plata

Congreso; SAIC REUNIÓN LV; 2010

El melanoma espontáneo canino mucoso (MECM) oral, digital o uveal es un tumor altamente maligno, metastásico y letal que se caracteriza por su rápido crecimiento, invasión local ymetástasis temprana. La cirugía, si bien mejora transitoriamente la situación del paciente, no previene la recidiva, ni la aparición de metástasis, ni aumenta significativamente el lapso de supervivencia. En el presente trabajo se ensayaron, en distintas líneas celulares derivadas de MECM, los efectos de la combinación del tratamiento genético del IFNâ canino (cIFNb) con: i) bortezomib (BTZ, inhibidor reversible del proteosoma 26S; o ii) dicloroacetato (DCA, inhibidor inespecífico de la enzima piruvato deshidrogenasa quinasa). Células control y lipofectadas con el plásmido psCMVbetagal o psCMV-cIFNb fueron sembradas como monocapas (mc) o como esferoides sobre cubierta de agar sólido (esf). Luego de 24 hs, se agregaron las drogas, y a los 5 días (mc) ó 12 días (esf) se determinó la viabilidad utilizando el reactivo MTS. Para evaluar el efecto de la lipofección del gen cIFN-B sobre las drogas se graficaron las curvas relativizando los 2 tratamientos génicos a su respectivo cero de concentración (100%) para poder determinarla concentración inhibitoria 50 (IC50). Los resultados mostraron que la combinación del gen cIFNb con BTZ en mc tuvo un efecto sinérgico en cuatro de las seis líneas evaluadas: Ak (p<0,01),Bk (p<0,01), Ol (p<0,01), Ll (p<0,05); y un efecto aditivo en Br y Bts. En cambio, la combinación del gen cIFNb con DCA en las cinco líneas evaluadas mostró efectos variables: sinérgicos(Mo, p<0,05; Ol, p<0,05), antagonistas (Ch, p<0,01) y aditivos (Bk; Cn; Ak). Por otro lado, se observaron efectos aditivos en las dos lineas cultivadas como esf (Ol; Mo). Teniendo en cuentalas escasas opciones terapéuticas efectivas disponibles en la actualidad, los resultados obtenidos estimulan la continuación del desarrollo de nuevas estrategias combinadas para el tratamientode esta neoplasia.