Melatonina revierte el efecto inhibitorio de menadiona sobre la absorción intestinal de calcio

ARECO V, CARPENTIERI A, MARCHIONATTI A, PEREZ A, CENTENO V, TOLOSA DE TALAMONI N,

Córdoba

Jornada; XI Jornadas de investigación científica; 2010

Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Córdoba

En un trabajo previo hemos demostrado que la melatonina (MEL) revierte el efecto inhibitorio de menadiona (MEN) sobre la absorción intestinal de calcio. El propósito de este trabajo fue dilucidar los mecanismos moleculares subyacentes a esta respuesta. Para ello, se utilizaron pollos de 4 semanas de edad, los cuales fueron divididos en 4 grupos: 1) controles, 2) tratados con MEN (2,5 µmol/kg de peso) 3) tratados con MEL (10 mg/kg de peso) 4) tratados con MEL  después de inyección con MEN. La expresión de genes y proteínas de las moléculas implicadas en el transporte transcelular de Ca2+ se estudiaron mediante las técnicas de RT-PCR y Western Blot, respectivamente. El estrés oxidativo se evaluó mediante la medición del contenido de glutatión (GSH) y el estudio de la actividad de enzimas del sistema antioxidante. La apoptosis se determinó en base a la fragmentación de ADN, expresión inmunocitoquimica del citocromo c y actividad de caspasa 3. La permeabilidad de la membrana mitocondrial fue determinada por la técnica de swelling. Los resultados fueron evaluados por medio de ANOVA y test de Bonferroni. Los datos indican que MEL disminuyó las expresiones génica y proteica de la bomba de  Ca2+, las cuales fueron revertidas completamente por MEL. MEN causó estrés oxidativo a juzgar por la disminución  del contenido de GSH, alteración del potencial de membrana mitocondrial y por el incremento en la actividad de las enzimas superóxido dismutasa y catalasa. Todos estos efectos fueron revertidos por MEL. MEN causó apoptosis mitocondrial,  que se manifestó por el incremento en la fragmentación del ADN, la expresión del citocromo c y la actividad de caspasa 3. MEL también contrarrestó estos efectos. MEL por sí misma no alteró ninguna de las variables estudiadas, excepto las expresiones proteica y génica de la bomba de Ca2+, las cuales fueron estimuladas por la hormona. En conclusión, MEL revierte el efecto inhibitorio de MEN sobre la absorción intestinal de Ca2+  por  compensación del estrés oxidativo, de la apoptosis y por estimulación de  la expresión génica y proteica de la bomba de Ca2+,   la principal molécula involucrada en la absorción transcelular de Ca2+.