Silibinina previene la alteración de la función y localización de la bomba exportadora de sales biliares BSEP inducida por estradiol-17beta-glucurónido en duplas aisladas de hepatocitos: rol del AMPc

CROCENZI FA; PORTESIO MS; BASIGLIO CL; ROMA MG

Mar del Plata

Congreso; XLVIII Runion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2003

SAIC

Antecedentes y objetivos: La silimarina, administrada in vivo, previene la colestasis por estrógenos. Puesto que, estradiol 17β-glucurónido (E17βG) induce internalización de Bsep, estudiamos en duplas aislada de hepatocitos de rata (DAH) si silibinina (SB), componente activo de la silimarina, previene los cambios en la localización y función de Bsep inducidos por E17βG. Métodos y resultados: EL % de DAH acumulando apicalmente el sustrato fluorescente de Bsep colillisisfluorescenína (CLF) fue disminuído por E17βG (50 µM). SB (2.5 µM) previno completamente este efecto. El efecto beneficioso de SB fue abolido por el quelante de Ca2+ intracelular BAPTA/AM, pero no por el inhibidor de PKA KT5720 (DAH acumulando CLF, % del control: E17βG: 43 ± 2*; E17βG+SB: 93 ± 1#; E17βG+SB+BAPTA/AM: 50 ± 4*; E17βG+SB+KT5720: 92 ± 3#; +p<0.05 vs control, #p<0.05 vs E17βG). E17βG indujo internalización endocítica de Bsep, visualizada por inmunofluorescencia; este efecto fue prevenido por SB (% de Bsep en el canalículo: Control: 69 ± 2; E17βG: 38 ± 3*; SB+E17βG: 59 ± 3*#). Dado que silimarina es un potente inhibidor de la AMPc-fosfodiesterasa y que AMPc protege de la internalización de Mrp2 inducida por E17βG, analizamos si SB incrementa el AMPc intracelular en hepatocitos y si sus efectos son mimetizados por dibutiril AMPc (DB-AMPc). SB incrementó los niveles celulares de AMPc (+62 ± 4%, p<0.05). DB-AMPc mimetizó la capacidad de SB para prevenir tanto la alteración en la acumulación apical de CLF como la internalización de Bsep inducida por E17βG. Más aún, el efecto beneficioso de DB-AMPc fue también dependiente de Ca2+, pero no de PKA. Conclusiones: Estos resultados sugieren que SB previene la falla excretora de sales biliares inducida por E17βG contrarrestando la internalización de Bsep, posiblemente por un mecanismo dependiente de las elevaciones de Ca2+ intracelular inducidas por AMPc.