Echinococcus granulosus: establecimiento del cultivo primario a partir de protoescólices

ALBANI CLARA MARÍA; CHISARI ANDREA; ELISSONDO MARÍA CELINA; DENEGRI GUILLERMO MARÍA

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La posibilidad de obtener cultivos de células de helmintos parásitos ha sido raramente explotada hasta el presente. Por lo cual, el establecimiento del cultivo primario del estadio larval de E. granulosus sería de gran importancia no solo para comprender con mayor profundidad el ciclo de vida de este parásito, sino también para analizar sus propiedades bioquímicas y metabólicas con el objetivo de desarrollar nuevas y más eficientes alternativas terapéuticas. El objetivo de este trabajo fue poner a punto el método de cultivo celular in vitro de E. granulosus a partir de protoescólices. Los protoescólices fueron digeridos con tripsina al 0.25% durante 30 min a 37 ºC con agitación constante. Luego las células fueron colectadas por centrifugación. Se evaluó la vitalidad con azul tripan  y se las colocó en frascos plásticos conteniendo medio 199 suplementado con antibióticos, glutamina 2mM, 2-mercaptoetanol 5.10-5 M, 10% de líquido hidatídico y 10% de suero fetal bovino. Las botellas fueron colocadas en estufa a 37 ºC y el cambio de medio se realizó cada 48 hs. Las células fueron observadas diariamente. Empleando la técnica descripta fue posible obtener cultivos primarios a partir de células de protoescólices. Entre las 24 y 48 hs se pudieron observar diferentes tipos celulares y en todos los casos grupos de células adaptadas emitiendo prolongaciones. Hacia el futuro se espera lograr el establecimiento de una línea celular, lo cual constituye una poderosa herramienta para llevar a cabo estudios a nivel molecular, estudios inmunológicos y para realizar screening de nuevas drogas.