Zonda: un nuevo gen regulador de la autofagia y del tráfico vesicular

ROCIO VICTORIA DE LA RIVA CARRASCO; AYELÉN VALKO; NURIA M. ROMERO; JULIETA MARIA ACEVEDO; MARIANA MELANI; PABLO WAPPNER

Taller; II Taller de Biología Celular y del desarrollo; 2014

La vía autofágica se encuentra estrechamente relacionada con la maquinaria de tráfico endocítico vesicular. Los aspectos mecanísticos acerca de cómo estas vías se coordinan siguen sin comprenderse en su totalidad. En nuestro laboratorio hemos descripto la función de un nuevo gen de Drosophila, zonda, como un importante regulador de la vía autofágica, cuya función podría impactar en la actividad de la vía endocítica. Zonda es necesario para la autofagia ya que su pérdida de función, por RNA de interferencia, impide la inducción de la autofagia estimulada por ayuno, analizada por diversos parámetros: 1) formación de autofagosomas (nucleación de GFP-ATG8), 2) aumento en número y tamaño de la población lisosomal (incorporación de lysotracker y GFP-Lamp), y 3) flujo autofágico (degradación de Ref(2)-P). La distribución subcelular de Zonda es consistente con una función temprana en la autofagia: presenta un patrón de distribución retículo-vesicular en cuerpo graso de larvas alimentadas y se concentra en foci discretos, asociados a ATG8, inmediatamente después de inducida la autofagia. A tiempos prolongados de autofagia, Zonda colocaliza con ATG8 y Lamp, indicando que forma parte de autofagosomas y autolisosomas. La nucleación de Zonda inducida por ayuno depende de Atg1 pero no de Vps34. Además, Zonda es requerido para la actividad autofágica de Vps34 ya que la distribución de FYVE-GFP, reportero de acumulación de PI3P, no responde al ayuno en ausencia de Zonda. Por otro lado, la depleción de zonda en el disco imaginal de ojo resulta en la despigmentación del ojo de la mosca adulta, el cual está fuertemente asociado a defectos en la biogénesis de los gránulos de pigmento, lisosomas especializados de las células del ojo de Drosophila. Este fenotipo es similar al del grupo de las mutantes de los ?genes de color de ojo?, algunos de los cuales están involucrados en el tráfico endocítico. Encontrado que células mutantes para zonda acumulan Delta, Notch y EGFR, sugiriendo que zonda podría participar en la vía de tráfico vesicular de estas proteínas de membrana. Nuestros resultados indican que zonda podría coordinar diversos aspectos del tráfico vesicular intracelular, incluyendo la autofagia.