VÍAS DE SEÑALIZACIÓN INVOLUCRADAS EN LA CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA DEPENDIENTE DE LA EXCLUSIÓN DE AMPc EN BOVINOS.

CARLOS AGUSTIN ISIDRO ALONSO; LUCIANA CASTELLANO; CLAUDIA ELENA OSYCKA SALUT; CARLOS DAVIO; SILVINA PEREZ MARTINEZ

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

La capacitación espermática (CE) es un proceso necesario para que el espermatozoide (ESP) adquiera capacidad fecundante. La misma implica un complejo diálogo molecular que incluye cambios en la fluidez de membrana, incremento de Ca2+ y AMPc y activación de kinasas. En otros tipos celulares, en condiciones fisiológicas y patológicas el AMPc es excluido por proteínas de resistencia a multidrogas (MRPs), en particular MRP4, regulando la homeostasis celular. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio indican que frente a una concentración moderada de bicarbonato en el medio (40 mM), los ESP bovinos sufren un proceso de exclusión de AMPc vía el transportador MRP4 que es crítico para la CE. A su vez, el AMPc extracelular actúa sobre el receptor A1 activando vías de señalización intracelulares que dependen de una PLC y de la adenilato ciclasa soluble. Es por ello que en el presente trabajo nos propusimos ahondar en las vías de señalización involucradas en la CE inducida por bicarbonato o AMPc. Para ello se llevaron a cabo capacitaciones in vitro con bicarbonato (40 mM) o AMPc (10 nM), en ausencia o presencia de diferentes inhibidores farmacológicos. Alícuotas de ESP fueron separadas para evaluar el estado de capacitación mediante la técnica de CTC. Por otro lado se extrajeron proteínas totales para evaluar el estado de fosforilación de sustratos de PKA (pPKA), residuos de tirosina (pTyr), o ERK1/2. Los resultados indican que el bicarbonato y el AMPc incrementan pPKA y pTyr, mostrando diferentes perfiles de activación en el tiempo (p