Ensayos in vitro para estudiar el efecto de productos biomédicos y biotecnológicos mediante el análisis de la expresión relativa de genes de interés

PORPORATTO C; BOHL LP; ANGIOLINI VA

2020-07-01

2020-08-01

Sanidad animal

Ensayos in vitro para estudiar el efecto de productos biomédicos y biotecnológicos mediante el análisisde la expresión relativa de genes de interés. Según las características del producto a evaluar se acuerda el diseño experimental en placas de 6, 12 o24 pocillos conteniendo una línea celular adecuada al producto a ser analizado. Dicho producto puedeser administrado en diferentes dosis y tiempos de tratamiento. En función del interrogante planteado, sepropone uno o más genes de interés, los que son cuantificados en base a un gen de referencia, parasaber si los tratamientos aplicados generan cambios sobre su expresión. Se recepta el producto. Se propone: 1. Contar las células en cámara de Neubauer; 2. Plaquear igualnúmero de células por pocillo; 3. Administrar el tratamiento según el modo definido por el cliente; 4.Recolectar las muestras; 5. Extraer el ARN total por kit en columna; 6. Cuantificar el ARN en picodrop; 7.Poner a punto la reacción de RT-qPCR; 8. Analizar la expresión génica relativa por RT-qPCR. 9.Calcular la expresión por el método 2-##Ct; 10. Elaborar el análisis estadístico y las conclusiones paraentregar al cliente. Destinatarios: Empresarios, productores o personal independiente que trabaje en eldesarrollo de productos biotecnológicos o biomédicos.