INTERACCION DE Staphylococcus coagulasa negativos CON CELULAS EPITELIALES MAMARIAS BOVINAS MAC-T

CONESA A; BOHL LP; BRESER ML; RASPANTI C; PORPORATTO C

Jornada; XI Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria (AAIV); 2018

La mastitis bovina (MB) estafilocócica es considerada como una de las principales causas de pérdidas económicas en el ganado lechero, asociado a casos crónicos. El microentorno que rodea a la bacteria in vivo, tiene un papel importante en su protección, tanto frente al sistema inmune como a los agentes antimicrobianos. Este, puede conseguirse por varios factores de virulencia como la formación de una biopelícula (biofilm), de desarrollo propio y adherente a superficies vivas o inertes, y por la capacidad de internalizar en las células epiteliales del huésped, sobreviviendo dentro de las mismas. Estudios recientes muestran que diferentes especies de Staphylococcus coagulasa negativas (SCN), pueden desarrollar estas capacidades. El objetivo de este estudio fue evaluar en diferentes aislamientos de SCN, identificados a nivel de especie, su capacidad de formación de biofilm, la interacción con las células epiteliales MAC-T y la respuesta inmune inducida. Se evaluó la capacidad de adherencia, internalización y sobrevida de 3 especies de SCN más prevalentes aisladas en la cuenca lechera de Villa María y se investigó la posible asociación con la capacidad para formación de biofilm. Para caracterizar las respuestas inmunes innatas se midió la concentración de citoquinas pro-inflamatorias IL-6 e IL-1β inducidas por la estimulación in vitro de la línea celular empleando la técnica de ELISA. El análisis de los datos no mostró diferencias significativas atribuibles a la especie para los parámetros adherencia e internalización, sin embargo la sobrevida fue significativamente superior para S. xylosus. En cuanto a la capacidad de formación de biofilm, del total de aislamientos, no se encontró una relación respecto a adherencia y sobrevida, sin embargo, aquellas bacterias que presentan una menor capacidad de formación de biofilm mostraron una capacidad de internalizar significativamente mayor. Estos resultados indicarían que las cepas que producen biofilm invaden a las células epiteliales con menor eficiencia que las que no lo forman, sugiriendo que aquellas cepas que tiene la capacidad de invadir no necesitan la formación de biofilm para sobrevivir en el huésped. Se consideraron 9 cepas de SCN productoras de biofilm y se llevo a cabo el ensayo de interacción con MAC-T, observándose que sólo una cepa de S. xylosus desencadenó un incremento en la producción de ambas citoquinas (ELISA). La respuesta inflamatoria inducida por esta cepa de S. xylosus resulta de interés dado que esa es una de las especies de SCN más prevalente y que presenta una fuerte capacidad para formar biofilm, resultando una candidata para obtener posibles antígenos vacunales. En este estudio se muestra que las células epiteliales mamarias MAC-T presentan una fuerte capacidad de defensa inmune innata y la capacidad de atraer células inmunes circundantes como los neutrófilos mediante la secreción de citoquinas proinflamatorias. Los resultados obtenidos resultan relevantes dado que existe escaso conocimiento sobre la capacidad de sobrevida intracelular de las distintas especies de SCN, los cuales permitirían el desarrollo de nuevas estrategias dirigidas a este grupo de patógenos