ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO SOBRE Staphylococcus aureus Y Staphylococcus xylosus PARA USO EN EL TRATAMIENTO DE MASTITIS BOVINA

ORELLANO MS; ISAAC P; BOHL LP; BRESER ML; FALCONE D; PORPORATTO C

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología XIV Congreso Argentino de Microbiología.; 2016

Una de las principales enfermedades que afecta a la industria láctea es la mastitis bovina (MB). Staphylococcus aureus es el principal patógeno asociado a infecciones intramamarias persistentes, sin embargo en los últimos años la prevalencia de los Staphylococcus coagulasa-negativos incrementado a nivel mundial, considerándose un patógeno emergente. Estas bacterias tienen la habilidad de formar biofilms, y de esta forma se protegen del sistema inmune del huésped y de los agentes antimicrobianos. La dificultad en la erradicación de infecciones por bacterias formadoras de biofilm, subraya el interés por el desarrollo de nuevas herramientas de control. El empleo de nanomateriales en medicina ha posibilitado el desarrollo de terapias más eficaces. Quitosano (Q) es un polisacárido de acetil-glucosamina parcialmente deacetilado. Este polímero es biodegradable, biocompatible y presenta propiedades atractivas para ser utilizado en la obtención de nanoparticulas, por lo cual resulta de interés evaluar el uso de nanoparticulas de quitosano (NPs-Q) como posible tratamiento contra la MB. Un método poco aplicado a la obtención de NPs-Q es el que emplea micelas inversas (MIs) como moldes. Las MIs son sistemas que se obtienen al disolver moléculas anfifílicas en un solvente no polar, y las NPs-Q se forman dentro del corazón polar y crecen mientras este espacio confinado se lo permita. Esta metodología proporciona un alto control del tamaño de las nanopartículas generadas y presenta alta reproducibilidad. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antimicrobiana de NPs-Q frente a S. aureus V329 y S. xylosus 1007 aislados de MB, y compararla con la actividad del polímero precursor. Se utilizo Q con grado de deacetilación de 79% y mediante MIs se obtuvieron NPs-Q de 134 nm. Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) y bactericida mínima (CBM) de las NPs-Q mediante el método de microdilución en placa, usando como control S. aureus ATCC 29213. La CIM de las NPs-Q sobre las tres cepas evaluadas fue de 200 µg/ml, mientras que la CBM para V329 y ATCC 29213 fue de 200 µg/ml y para 1007 de 400 µg/ml. Paralelamente, tanto la CIM como la CBM de Q frente a las tres cepas fue de 1600 µg/ml. Se determinó el efecto de las NPs-Q y Q sobre la cinética de crecimiento de V329 a una concentración de 200 ug/ml, observándose que NPs-Q produjo una reducción del 96% en la tasa de crecimiento mientras que Q sólo del 67%. Se evaluó el efecto de NPs-Q en la inhibición de la formación de biofilms por V329 y 1007 con la técnica de cultivo en placa y tinción con cristal violeta. Se determinó una inhibición en la formación de biofilms a concentraciones menores que Q, siendo significativo a partir de 200 ug/ml de NPs-Q (p