EFECTOS ANTINEOPLASICOS DEL CALCITRIOL Y DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA EN CELULAS CACO-2

LIAUDAT AC; BOHL LP ; TOLOSA DE TALAMONI NG ; MALETTO B; PISTORESSI MC; PICOTTO G

Otro; LVI Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC). Reunión Científica Anual 2011 Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS). II Congreso Nacional y IV Reuni¨®n Cient¨ªfica Regional por el Bienestar del Animal de Laborato; 2011

El calcitriol ha sido reconocido como un potente agente antiproliferativo y promotor de diferenciación celular. Por otro lado, se ha demostrado que D,L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), aumenta la sensibilidad de las células neoplásicas a los tratamientos. El objetivo del trabajo fue determinar el efecto del calcitriol y BSO sobre la proliferación de las células de cáncer de colon y evaluar los posibles mecanismos involucrados. Las células Caco-2, derivadas de adenocarcinoma de colon humano, se trataron con calcitriol (1-200 nM),  BSO (2-500 uM) o con ambas drogas o su vehículo a diferentes tiempos. La proliferación celular se determinó por la técnica de violeta de cristal. La actividad de las enzimas superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), fosfatasa alcalina (FAL) y los niveles de glutatión (GSH) se midieron por espectrofotometría. La externalización de fosfatidil serina, el potencial de membrana mitocondrial y el ciclo celular se evaluaron por citometría de flujo. La actividad de caspasa 3 se midió por ELISA. El análisis estadístico se realizó por ANOVA/Bonferroni. Los resultados demuestran que tanto calcitriol como BSO inhibieron la proliferación de las células Caco-2. El contenido total de GSH disminuyó a las 6 y 48 hs con BSO y con el tratamiento combinado. A las 96 hs la actividad de CAT y el potencial de membrana mitocondrial aumentaron sólo con el tratamiento combinado mientras que la actividad de SOD no se modificó. La actividad de FAL aumentó en las células tratadas con calcitriol  y con ambas drogas a las 96 hs. El ciclo celular no se alteró y no se registraron cambios en los parámetros evaluados para la apoptosis. En conclusión, BSO incrementa el efecto antiproliferativo del calcitriol sobre las células Caco-2 mediante aumento del estrés oxidativo. La muerte celular por apoptosis no estaría involucrada. El incremento de FAL sugiere una inducción de la diferenciación celular.