EL CRECIMIENTO DE CÉLULAS DE CÁNCER DE MAMA CON FENOTIPOS DIFERENTES ES INHIBIDO POR L-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA Y 1,25(OH)2D3

BOHL L; LIAUDAT A; PICOTTO G; MARCHIONATTI A; NARVAEZ C; WELSH J; TOLOSA DE TALAMONI N

Jornada; XIII Jornada de Investigación Científica de la Facultad de Ciencias Médicas R.D. 247/12; 2012

El metabolito activo de la vitamina D3 (1,25(OH)2D3 o calcitriol) regula la proliferación de células de cáncer de mama, este efecto se acompaña de un incremento en la calcemia in vivo. En nuestro laboratorio se ha demostrado que L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), droga que disminuye el glutatión, incrementa la acción antiproliferativa de 1,25(OH)2D3 sobre células de cáncer de mama MCF-7 induciendo un desequilibrio en el estado redox y un bloqueo del ciclo celular. El objetivo del trabajo fue profundizar en los mecanismos inducidos por BSO y 1,25(OH)2D3 en las células MCF-7 y extender su uso combinado a otras líneas celulares de cáncer de mama. Las células MCF-7, MCF-7DR y HMLER se trataron con calcitriol 100 nM, BSO 20 µM o ambos durante 96 hs. El crecimiento celular se estudió con la técnica violeta de cristal. En las células MCF-7, la actividad de la enzima superóxido dismutasa (SOD) se determinó por espectrofotometría y la apoptosis mediante detección de caspasas activas in situ (microscopía de fluorescencia) y evaluación de la expresión del gen antiapoptótico Bcl2 (RT-qPCR). Los resultados se analizaron con ANOVA y test post-hoc de Bonferroni (significancia a p<0,05). BSO, 1,25(OH)2D3 y el tratamiento combinado inhibieron la viabilidad de las células MCF-7 y HMLER. En las células MCF-7DR, el calcitriol no provocó efecto sobre el crecimiento mientras que el BSO ejerció pequeña acción antiproliferativa que incrementó cuando se utilizó en combinación con 1,25(OH)2D3. La actividad SOD fue mayor en células expuestas al 1,25(OH)2D3 y 1,25(OH)2D3 más BSO. Se encontró más activación de caspasas en células tratadas con 1,25(OH)2D3 (96 hs) y 1,25(OH)2D3 más BSO (72 y 96 hs). Calcitriol y calcitriol más BSO ocasionaron disminución en la expresión de Bcl2. En conclusión, el mayor efecto inhibitorio del crecimiento obtenido con el tratamiento conjunto en las células MCF-7 es provocado por un desequilibrio en el estado redox celular e inducción de apoptosis. El uso combinado de las drogas permitiría disminuir la dosis de calcitriol atenuando el desbalance de calcio y podría ser de utilidad para eliminar las células que hayan adquirido resistencia al 1,25(OH)2D3 y los tumores de mama triple negativos.