EFECTOS DE CALCITRIOL Y DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA SOBRE LA PROLIFERACIÓN DE CÉLULAS EPITELIALES INTESTINALES NEOPLÁSICAS

LIAUDAT C., BOHL L., TOLOSA DE TALAMONI N., PICOTTO G.

Córdoba

Jornada; 1ras. Jornadas Latinoamericanas Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO). Ateneo Regional Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología (FASEN). X Jornadas Científicas Anuales SEMCO; 2008

SEMCO

Estudios epidemiológicos sugieren que la vitamina D3 y su metabolito activo,  el 1,25(OH)2D3 o calcitriol, disminuyen el riesgo de contraer cáncer de colon. A nivel experimental, se ha demostrado que esta hormona reduce la proliferación de células de cáncer de colon Caco-2. Uno de los mecanismos que subyacen a este efecto es el incremento del estrés oxidativo. Sin embargo, el uso del calcitriol produce efectos secundarios indeseables tales como la hipercalcemia. En consecuencia, han surgido nuevas estrategias terapéuticas. Dado que se ha observado que el DL-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), inhibidor de la síntesis de glutatión (GSH), potencia el efecto anticarginogénico de otras drogas, nuestra hipótesis es que el BSO podría aumentar la acción antineoplásica de la vitamina D3, permitiendo disminuir las dosis altas de calcitriol y, por ende, sus efectos secundarios. En base a las consideraciones precedentes, el objetivo de nuestro trabajo fue medir a diferentes tiempos y concentraciones el efecto del  1,25(OH)2D3 y del BSO sobre la proliferación de células de cáncer de colon y evaluar los efectos de estos compuestos sobre las enzimas del sistema antioxidante y el contenido de GSH. Para ello, se emplearon células de cáncer de colon (Caco-2),  las cuales se cultivaron con medio mínimo esencial (10% suero fetal bovino) y se las trataron con diferentes dosis de calcitriol (1-200 nM), de BSO (20-500 mM), o con ambas drogas o vehículo (etanol < 0.1%) durante 3-96 horas. La proliferación celular se determinó por la técnica de violeta de cristal. La actividad de las enzimas superóxido dismutasa (SOD) y fosfatasa alcalina (FAL) se midió por espectrofotometría, al igual que los niveles de GSH. Los resultados se analizaron estadísticamente mediante ANOVA a una vía, seguido del test de Bonferroni como test post-hoc. Las diferencias entre grupos se consideraron significativas a p<0.05. Los resultados muestran que tanto BSO (35-500 mM) como la vitamina D3 (100-200 nM) inhibieron el crecimiento de las células Caco-2, efecto que fue dependiente del  tiempo y de la concentración. La mayor disminución de la proliferación celular se observó a las 96 hs de tratamiento, siendo este efecto potenciado cuando ambos compuestos se administraron en forma conjunta. Los niveles de GSH comenzaron a descender a las 3 hs  siendo máxima la disminución a las 6 hs bajo cualquier tratamiento. Las actividades de SOD y FAL no se modificaron por la adición de las drogas al medio de cultivo. Tanto calcitriol como BSO producen efecto antiproliferativo de las Caco-2. El mecanismo mediante el cual ambas drogas producen este efecto involucra depleción de GSH. El tratamiento combinado potencia la disminución del crecimiento celular. No está claro si la potenciación involucra incremento del estrés oxidativo ya que la actividad de SOD y CAT no se modifica. FAL tampoco se altera con los distintos tratamientos. Los mecanismos moleculares de la potenciación están bajo investigación.