EL TRATAMIENTO DE CÉLULAS EPITELIALES MAMARIAS BOVINAS CON 1,25 DIHIDROXIVITAMINA D3 INHIBE LA INTERNALIZACIÓN Y PROMUEVE LA ERRADICACIÓN DE BIOFILMS DE Staphylococcus SPP

TIRABOSCHI G; ISAAC P; BRESER ML; PORPORATTO C; BOHL L

Jornada; XIV Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria. II Reunión Latinoamericana de Inmunología Veterinaria; 2022

Los microorganismos utilizan distintos mecanismos para persistir en la glándula mamaria bovina como la vida intracelular en células epiteliales y fagocitos profesionales y la formación de biofilms. La función inmunorreguladora de 1,25 dihidroxivitamina D3(1,25(OH)2D3) tiene un impacto potencial sobre la mastitis del ganado bovino lechero. Considerando lo mencionado, el objetivo de este trabajo fue estudiar los efectos de1,25(OH)2D3 sobrecélulas epiteliales mamarias bovinas, biofilms de Staphylococcus spp y su interacción. Se utilizó la línea celular de epitelio mamario bovino, MAC-T, y las cepas S.aureus V329, S. chromogenes 40 y S. haemolyticus 6 aisladas de animales con mastitis. La internalización se analizó mediante el ensayo de protección con gentamicina. La expresión génica relativa del receptor de la vitamina D (VDR), la enzima 24 hidroxilasa y las interleucinas (IL) 8, 6, 1β y el TNF-α se estudiaron mediante RT-qPCR. La erradicación de biofilms incubados en medio condicionado (MC) procedente de células MAC-T tratadas con 1,25(OH)2D3 se evaluó con microscopia confocal. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante ANOVA/Bonferroni. El pre-tratamiento con 1,25(OH)2D3 disminuyó la internalización de S. aureus en las células MAC-T. La expresión de la 24 hidroxilasa aumentó en forma dosis-dependiente en las células MAC-T tratadas mientras que la del VDR no se modificó en ninguna condición. Respecto a las citoquinas, los resultados preliminares demostraron que el 1,25(OH)2D3 no afectó su expresión. El MC proveniente de MAC-T tratadas con 1,25(OH)2D3 promovió la erradicación de biofilms de S. chromogenes 40 y S. haemolyticus 6. En conclusión, la 1,25(OH)2D3 interfirió con la entrada de bacterias a las células epiteliales e indujo muerte bacteriana en los biofilms de manera indirecta demostrando que es una buena candidata a considerar en las infecciones intramamarias producidas por Staphylococcus spp.