EFECTOS DEL CALCITRIOL SOBRE Staphylococcus SPP. AISLADOS DE ANIMALES CON MASTITIS, CÉLULAS BOVINAS Y SU INTERACCIÓN

TIRABOSCHI G; ISAAC P; BRESER ML; PORPORATTO C; BOHL LP

Jornada; II Jornada Nacional de Agroalimentos y Sustentabilidad; 2021

La mastitis bovina es la inflamación de la glándula mamaria del ganado lechero, causada principalmente por infecciones bacterianas. Actualmente los antibióticos son la estrategia terapéutica más utilizada por los médicos veterinarios para tratar esta infección de gran impacto en la economía regional. Además, los antibióticos se usan con fines profilácticos durante el secado de los animales favoreciendo la selección de cepas resistentes. Otro aspecto desfavorable es la acumulación de residuos de antibióticos en leche y en animales de consumo humano. Por ello, urge desarrollar tratamientos profilácticos y/o terapéuticos alternativos a los antibióticos que puedan aplicarse en animales productores de alimentos. Considerando las acciones de la vitamina D en el sistema inmunitario, el objetivo fue estudiar los efectos del calcitriol (o 1,25(OH)2D3, forma activa de la vitamina D) sobre Staphylococcus spp., células bovinas y su interacción. Hipotetizamos que tratamientos con 1,25(OH)2D3 estimulan la producción de péptidos antimicrobianos (PAs) en células bovinas y la fagocitosis por células inmunes. Se trabajó con cepas bacterianas formadoras de biofilm aisladas de mastitis: S. aureus V329, S. xylosus 4913, S. chromogenes 40 y S. haemolyticus 6. Se utilizaron las líneas celulares bovinas MAC-T, de epitelio alveolar mamario, y BoMac, derivada de macrófagos. Se analizó la biomasa bacteriana luego del tratamiento con calcitriol (25, 50, 100 y 200 nM, 24 hs de tratamiento) mediante espectrofotometría (620 nm). La citotoxicidad del 1,25(OH)2D3 se evaluó mediante la técnica de MTT en las células bovinas (25, 50, 100 y 200 nM, 24 y 72 hs de tratamiento). La expresión génica relativa de los PAs Lingual (LAP) y Traqueal (TAP) se estudió en las células MAC-T y BoMac tratadas con calcitriol (50 o 100 nM, 24 hs) mediante transcripción reversa seguida de PCR en tiempo real. El efecto de la vitamina D (25 y 50 nM) sobre la fagocitosis de patógenos por las BoMac se estudió mediante el ensayo de protección con gentamicina. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante ANOVA/Bonferroni (diferencias significativas p