Descifrando el interactoma de miARN-ARNm necesario para las transiciones epitelio-mesénquima-epitelio (EMT/MET) de las células de la cresta neural embrionaria.

MARQUEZ, ROCIO; BERNARDI, YANEL; ALONSO, ANDRÉS; COCHELLA, LUISA; STROBL MAZZULLA, P.H.

Jornada; 1era Jornada Itinerante de Epigenética; 2022

Durante el desarrollo embrionario de vertebrados y al final de la neurulación, se inicia la delaminaciónde un grupo de células progenitoras multipotentes, conocidas como células de la cresta neural (CCN),mediante un proceso denominado transición epitelio-mesénquima (EMT). De manera inversa y enciertas regiones del embrión estas células necesitan condensarse para formar ciertos ganglios cranealesmediante un proceso similar a la transición mesénquima-epitelio (MET). Durante ambas transiciones, lasCCN sufren cambios moleculares y celulares que asemejan mucho a las transiciones que ocurren en lascélulas tumorales durante la metástasis. Particularmente, se ha demostrado que los microARNs8(miARNs) juegan un papel crucial en la modulación de la expresión génica durante dichas transicionestanto en cáncer como durante el desarrollo embrionario normal. En este sentido, nuestro objetivo fueidentificar miARNs claves involucrados en las EMT (delaminación) y MET (condensación) de las CCN, ypredecir sus genes blanco para abordar experimentalmente la funcionalidad de los mismos enembriones de pollo. Para esto realizamos miRNA-seq y mRNA-seq a partir de CCN obtenidas por FACS apartir de embriones electroporados con reporteros fluorescentes en estadios premigratorio, migratorioy condensantes. El análisis comparativo entre estadios nos lleva a la identificación de dos grupos demicroRNAs exclusivos de las CCN durante la EMT (miR-140-3p, miR-140-5p y miR-455-3p) y la MET (miR-23b-3p, miR-187-3p y miR363-5p). Al comparar mediante una búsqueda in silico de los genes blanco delos miRNAs (predictores TargetScan y miRDB) y los genes downregulados en cada transición, pudimosidentificar grupos de genes vinculados en procesos biológicos de adhesión celular, regulación de lacomunicación celular, señalización y morfogénesis. Como perspectiva, nos encontramos iniciando losexperimentos de pérdida y ganancia de función de estos miRNAs para establecer su real participaciónen los procesos de EMT y MET. Estos estudios nos permitirán tener un mayor entendimiento de ladinámica de las transiciones EMT-MET en un sistema completamente in vivo para poder tranzar unfuturo paralelismo y las implicancias de estos actores durante la metástasis tumoral.