Tráfico no convencional y disposición de proteínas de membrana en Trypanosoma cruzi

GIANNINA CARLEVARO; ANDRES LANTOS; JUAN M. BURGOS; OSCAR CAMPETELLA; JUAN MUCCI

Buenos Aires

Congreso; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología SAP; 2015

A diferencia de los mamíferos, lamembrana plasmática de los tripanosomátidos posee un alto porcentaje deproteínas ancladas por glicosil-fosfatidil-inositol (GPI). En T. cruzi, hemosdemostrado que tres proteínas ancladas por GPI (trans-Sialidasa o TS, TSSA y mucinas)alcanzan la membrana plasmática a través de un transporte no convencional queinvolucra a la vacuola contráctil (VC), una organela ausente enmamíferos, involucrada enla osmoregulación en protozoarios. Para estudiar si constituye una víade tránsito general de proteínas hacia la superficie del parásito, analizamos eltransporte de tres proteínas con distinto ancla a membrana [Calpaína (miristoilada ypalmitoilada), KMP (sin señal aparente) y TolT (GPI)], todas dispuestas endominios lipid raft de la membrana flagelar de tripomastigotes. Las proteínasfueron clonadas y expresadas para obtener anticuerpos específicos. Porinmunofluorescencia, solamente Tolú pudo ser observada en la VC durante sutransporte hacia la membrana plasmática, indicando que la VC no forma parte deuna vía de tránsito general, sino que estaría involucrada en el transporte deproteínas ancladas por GPI. Posteriormente analizamos la disposición de lastres proteínas en la membrana. Todas se observan en dominios discretos, detamaños variables segúnu la proteína, en la membrana que recubre el flagelo delos tripomastigostes. Como se esperaba, ninguna proteína estudiada colocalizócon la TS (presente en dominios no lipid rafts like). Sin embargo tampocofueron observadas en dominios lipid rafts marcados por las mucinas, Estos últimosresultados indican que la membrana del parásito estaría formada por múltiplesdominios estables, más allá de la distinción entre loso tipos de dominios lipídicos.