Transmisión de los corpúsculos C en Pomacea canaliculata

KOCH, E.; CASTRO-VAZQUEZ A

Mendoza, Argentina

Workshop; POMACEA; 2003

Transmisión de los corpúsculos C en Pomacea canaliculata   E. Koch y A. Castro-Vazquez Área de Fisiología Normal, Departamento de Morfología  y Fisiología, e Instituto de Histología y Embriología “Dr. Mario H. Burgos”, UNCuyo-CONICET, Casilla de Correo 33, 5500 Mendoza. E-mail: ekoch@fcm.uncu.edu.ar   En el presente trabajo quisimos poner a prueba la hipótesis de la trasmisión horizontal de los corpúsculos simbióticos de tipo C. Como los recién nacidos son detritívoros, y los adultos eliminan gran cantidad de corpúsculos C y K en las heces, es simple suponer que los recién nacidos los puedan adquirir por ingestión. Intentamos impedir esa forma “horizontal” de transmisión del simbionte, y así obtener juveniles aposimbióticos. Sin embargo, como veremos, los resultados sugirieron la transmisión vertical del presunto simbionte, cuyos precursores estarían ya dentro del huevo.   Para esto diseñamos un método para extraer embriones en condiciones estériles y cultivarlos en medio también estéril. Las oviposiciones recientes fueron disgregadas en una solución de SDS-NaOH, lavadas, secadas y pulverizadas con Pervinox®, y luego incubadas a 25ºC durante dos semanas, al cabo de la incubación se extrajeron los embriones con material de disección estéril.   Los cultivos se hicieron en frascos de 25 cm2 conteniendo 10 ml de un medio de cultivo consistente en un extracto de huevos diluido en solución salina, esterilizado en autoclave y adicionado de antibióticos (penicilina 480UI/ml, estreptomicina 10µg/ml). Se introdujeron cinco animales por frasco. En estas condiciones los caracoles se desarrollan adecuadamente durante al menos 10 días. El experimento fue detenido, sin embargo, a los 7 días, utilizando como controles las imágenes de los caracoles de esa misma edad, pero cultivados en acuario en las condiciones del experimento precedente. El día 7 se fijaron ejemplares para microscopía óptica y electrónica, y el medio se agitó para remover todo sedimento, el que luego se centrifugó, para observar la presencia o no de corpúsculos C y K en la materia fecal, y la presencia o no de bacterias contaminantes (extendidos coloreados con Giemsa y Gram).   Si bien la cantidad de corpúsculos C presentes en el epitelio alveolar es mayor en los animales de acuario que en los cultivados en esterilidad, se observan claramente corpúsculos C con vaina en el epitelio alveolar de los cultivados en frasco. No se observan, sin embargo, los corpúsculos que interpretamos como la forma primitiva de los corpúsculos K. La materia fecal obtenida de los sedimentos de los frascos (coloraciones de Giemsa y Gram) contenía corpúsculos C en los bolos fecales, los que parecen ser Gram negativos. Debe entonces concluirse que los corpúsculos C se desarrollan en las células columnares de animales que crecieron en condiciones estériles, por lo que parece refutarse la hipótesis de una transmisión horizontal.