Fijación de Flunitrazepam al receptor GABAA en filmes tipo Langmuir-Blodgett.

TURINA A. DEL V.; PERILLO M.A.

Los Cocos, Córdoba, Argentina.

Congreso; XVIII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Neuroquímica; 2003

El aumento en al densidad de receptores GABAA inducida por estrés agudo podría explicarse por cambios en la viscoelasticidad del plasmalema, la cual está inseparablemente asociada a la topología y al empaquetamiento molecular. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un modelo experimental que permitiera discriminar el efecto del empaquetamiento molecular sobre la accesibilidad de los sitios de unión de ligandos del R-GABAA. Los filmes tipo Langmuir-Blodgett (LB) fueron seleccionados dada su topología, definida y constante, y su empaquetamiento molecular ajustable mediante el control de la presión lateral (p).                 Membranas sinaptosomales (MS) de corteza de cerebro bovino, se depositaron, por expansión a partir de las vesículas, en una interfase agua-aire a los fines de preparar una capa monomolecular (CMM), la cual fue transferida, a p constante, a un soporte sólido hidrofóbico para formar filmes LB. La p aumentó  en función del tiempo a partir de momento en que se depositaron las vesículas de membranas sobre la superficie acuosa, hasta alcanzar un plateau, cuyo valor de p dependió de la cantidad de membranas sembradas, formando una CMM estable. Se realizaron dos ciclos de compresión-descompresión de las CMM. Esto permitió demostrar que las  CMM de MS mantuvieron la “memoria” de las interacciones que establecieron cuando estuvieron empaquetadas a alta p.   La relación proteína/fosfolípido en las MS, y LB fue 2,16±0,05, y 1,56±0,023 mg/mg. La fijación de [3H]flunitrazepam fue 260fmol/ml prot. en las vesículas de MS y  0.038fmol/mg prot. en los LB de MS. Concluyendo, fue posible prepapar CMM estables a partir de MS y recuperar una actividad escasa pero medible del sitio de unión de uno de los ligando de R-GABAA.