Aumento del contenido de trehalosa en cuatro microsimbiontes del maní cultivados en hipersalinidad

BUENO MIGUEL; GONZÁLEZ PAOLA S.; WOELKE MARIELA; DARDANELLI MARTA; GHITTONI NORA

Iguazú (Misiones)

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica; 1994

Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica

Algunas especies de Rhizobiaceae sintetizan el disacárido trehalosa en normosalinidad, sólo algunas cepas de estas especies incrementan la síntesis de trehalosa en hipersalinidad. Se ha comunicado un solo caso de una cepa (R. Meliloti SU-47) que no sintetizó trehalosa en normosalinidad y acumuló el disacárido durante el estrés salino. Los simbiontes del maní son rhizobium spp del grupo misceláneo; su respuesta bioquímica a la hipersalinidad no está estudiada. Trabajamos con estas bacterias, tres cepas donadas por colecciones internacionales: USDA 3187, TAL 1000; ATCC 10317, y una cepa aislada por nosotros: ATCC 51466. Para el cultivo microbiano empleamos técnicas clásicas. Para la extracción y purificación de oligosacáridos periplásmicos seguimos a Geremía y col (1987) y a Miller y Gore (1992). La identificación de trehalosa se hizo por CG en Hewlett-Packard 5890, comparando el tiempo de retención con testigos apropiados. Cada una de las cepas demostró características propias de crecimiento (USDA lento, las dos ATCC rápido, TAL muy rápido); de resistencia al CINa ( USDA menos resistente que las ATCC, y TAL muy resistente); de síntesis de trehalosa en el medio basal (no detectable en ATCC1466, trazas en ATCC10317, alrededor 1 mg/l cultivo en USDA y TAL). Pero las cuatro respondieron a la presencia de 100 a 400 Mm ClNa aumentando el nivel celular de trehalosa. El resultado fue parecido con distintas fuentes de carbono. La acumulación de trehalosa  fue proporcional al tiempo del estrés salino, y su nivel se redujo en 50% cuando al medio hipersalino se agregó un osmoprotector exógeno (10 Mm prolina ). No se pudo detectar trehalosa cuando las bacterias fueron transferidas de un medio hiper a uno normosalino. Nuestros resultados indican que en estas cuatro cepas de Rhizobium la trehalosa actúa como los solutos compatibles también llamados osmoprotectores.