Ultraestructura esplénica murina en la hemólisis inducida: estudios de microscopía electrónica

CALVO N; GIAMBELLUCA M; GATTI C; BREVEDAN M; ROQUE M

La Plata, Buenos Aires

Congreso; IX Congreso Argentino de Ciencias Morfológicas; 2004

La incapacidad del pasaje de eritrocitos por la microcirculación esplénica se asocia al envejecimiento y a patologías congénitas o adquiridas. Disfunciones morfofuncionales, como la injuria oxidativa, producen metahemoglobina, peroxidación lipídica y alteración de proteínas del citoesqueleto, acelerando la destrucción eritrocitaria. El objetivo del presente trabajo fue estudiar los efectos de la injuria oxidativa inducida, evaluando la ultraestructura esplénica. Se indujo hemólisis en ratones hembras CF1 (n=10), 32±2 g con dos dosis intraperitoneales (días:0y2) de Fenilhidrazina (60mg/Kg/500µI); lote control: solución fisiológica. La evolución y recuperación de la anemia se evaluó con: hematocrito, hemoglobina, reticulocitos, leucocitos. La sangre venosa se extrajo del plexo retroorbital con anestesia (días:0,4,7). Tuvieron acceso libre a alimento y agua con control diario de peso. Los procedimientos siguieron normas internacionales. Los animales fueron eutanizados por decapitación (días:0,4,7) y esplenectomizados por incisión en la región abdominal con el animal colocado de cúbito-dorsal. Para Microscopía Electrónica de Barrido se procesó el tejido por fijación con glutaraldehido. Se encontraron cambios significativos en la microestructura esplénita cuando el hematocrito alcanzó el valor mínimo (30%,día:4), respecto al control (50%), con formación de cuerpos de Heinz (equinocitos). Se observaron mecanismos de fagocitosis completa y parcial: eritrocitos "sensibilizados", formación de esferocitos por pérdida de membrana: "picoteo esplénico". El aumento reticulocitario (46%,día:7) coincidió con la recuperación del hematocrito (47%), presencia de células indiferenciadas, linfocitosis, hiperplasia y esplenomegalia. Podemos concluir que la microscopía electrónica de barrido brinda una visión tridi­mensional útil para evaluar cambios morfológicos y funcionales eritrocitarios, análogos a los observados en la senescencia y en patologías congénitas.