ESTUDIOS DE ESTABILIDAD QUÍMICA

SOLEDAD RAVETTI; MARÍA S. GUALDESI Y MARGARITA C. BRIÑÓN.

Córdoba, Argentina

Jornada; 3ras. Jornadas de Posgrado de la Facultad de Ciencias Químicas; 2006

Escuela de Posgrado - Facultad de Ciencias Químicas

Con la finalidad de obtener agentes antivirales que combatan al virus de la Inmunodeficiencia Humana Adquirida, se han desarrollado nuevos carbonatos de lamivudina (2-9), los cuales se obtuvieron por asociación con diferentes alcoholes alifáticos, con la finalidad de mejorar las propiedades farmacocinéticas subóptimas del compuesto líder, (3TC, 1). Es nuestro objetivo, evaluar el comportamiento de estos nuevos derivados frente a la hidrólisis química, datos necesarios para la programación de estudios de estabilidad enzimática y estudios farmacocinéticos, permitiéndonos conocer si el responsable de la actividad antiviral es la nueva molécula completa (situación en la que actuaría como droga), o bien si se produce una ruptura generando lamivudina (situación en la que estaría actuando como prodroga). Como primer paso en el estudio de la estabilidad química de esta nueva serie de derivados, se realizó una degradación acelerada para identificar los productos de hidrólisis. Para ello, a soluciones de 3TC y de sus derivados, se los lleva a condiciones extremas de pH (pH´s 1 y 13) y temperatura (60 ºC), para luego mediante técnicas adecuadas analizar los compuestos presentes en solución. En este caso, el seguimiento fue realizado mediante cromatografía en capa delgada (CCD) frente a testigos (1-9).1-9). S O RO N N O NH2O N N O NH22 Luego, en función de los resultados obtenidos en la etapa anterior, se seleccionó y validó el método analítico de cuantificación, y finalmente se realizaron los estudios de estabilidad, a partir de los cuales se obtuvieron datos cinéticos de interés. La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) fue el método analítico seleccionado para desarrollar dichos estudios (Tabla 1). Para los mismos se preparó una solución madre para cada compuesto y se tomaron alícuotas de éstas que se colocaron en baños termostatizados a 37 ºC. Para su cuantificación se utilizó HPLC, a una λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9), los cuales se obtuvieron por asociación con diferentes alcoholes alifáticos, con la finalidad de mejorar las propiedades farmacocinéticas subóptimas del compuesto líder, (3TC, 1). Es nuestro objetivo, evaluar el comportamiento de estos nuevos derivados frente a la hidrólisis química, datos necesarios para la programación de estudios de estabilidad enzimática y estudios farmacocinéticos, permitiéndonos conocer si el responsable de la actividad antiviral es la nueva molécula completa (situación en la que actuaría como droga), o bien si se produce una ruptura generando lamivudina (situación en la que estaría actuando como prodroga). Como primer paso en el estudio de la estabilidad química de esta nueva serie de derivados, se realizó una degradación acelerada para identificar los productos de hidrólisis. Para ello, a soluciones de 3TC y de sus derivados, se los lleva a condiciones extremas de pH (pH´s 1 y 13) y temperatura (60 ºC), para luego mediante técnicas adecuadas analizar los compuestos presentes en solución. En este caso, el seguimiento fue realizado mediante cromatografía en capa delgada (CCD) frente a testigos (1-9).1-9). S O RO N N O NH2O N N O NH22 Luego, en función de los resultados obtenidos en la etapa anterior, se seleccionó y validó el método analítico de cuantificación, y finalmente se realizaron los estudios de estabilidad, a partir de los cuales se obtuvieron datos cinéticos de interés. La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) fue el método analítico seleccionado para desarrollar dichos estudios (Tabla 1). Para los mismos se preparó una solución madre para cada compuesto y se tomaron alícuotas de éstas que se colocaron en baños termostatizados a 37 ºC. Para su cuantificación se utilizó HPLC, a una λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad., 1). Es nuestro objetivo, evaluar el comportamiento de estos nuevos derivados frente a la hidrólisis química, datos necesarios para la programación de estudios de estabilidad enzimática y estudios farmacocinéticos, permitiéndonos conocer si el responsable de la actividad antiviral es la nueva molécula completa (situación en la que actuaría como droga), o bien si se produce una ruptura generando lamivudina (situación en la que estaría actuando como prodroga). Como primer paso en el estudio de la estabilidad química de esta nueva serie de derivados, se realizó una degradación acelerada para identificar los productos de hidrólisis. Para ello, a soluciones de 3TC y de sus derivados, se los lleva a condiciones extremas de pH (pH´s 1 y 13) y temperatura (60 ºC), para luego mediante técnicas adecuadas analizar los compuestos presentes en solución. En este caso, el seguimiento fue realizado mediante cromatografía en capa delgada (CCD) frente a testigos (1-9).1-9). S O RO N N O NH2O N N O NH22 Luego, en función de los resultados obtenidos en la etapa anterior, se seleccionó y validó el método analítico de cuantificación, y finalmente se realizaron los estudios de estabilidad, a partir de los cuales se obtuvieron datos cinéticos de interés. La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) fue el método analítico seleccionado para desarrollar dichos estudios (Tabla 1). Para los mismos se preparó una solución madre para cada compuesto y se tomaron alícuotas de éstas que se colocaron en baños termostatizados a 37 ºC. Para su cuantificación se utilizó HPLC, a una λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.λ = 272 nm. Se inyectaron 20 μL de cada muestra y se utilizó un flujo de 1 mL/min, la columna se mantuvo a una temperatura de 35 ºC. A partir de los resultados obtenidos, se puede inferir que los nuevos derivados son estables a pH 1 y 7,4; mientras que a pH alcalino (pH 13) son muy inestables. En todos los casos, la hidrólisis de estos derivados da origen a 3TC como único producto de degradación y responden a una cinética de seudo primer orden. A partir de estos resultados, y teniendo en cuenta que 2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.2-9 tienen actividad antiHIV, se han programado estudios de estabilidad enzimática, ya que éstas juegan un rol preponderante en el metabolismo de las drogas. De esta manera se podrá predecir si en el organismo estos compuestos actuarán como drogas o prodrogas frente al agente causal de esta enfermedad.