Actividad antimicrobiana de Zymomonas mobilis frente a Penicillium digitatum agente causal del moho verde de los cítricos

ROMERO, M.E.; FOGLIATA, G. M.; RAMALLO, C.J.; PLOPER, L.D.

Tafí del Valle, Tucumán, Argentina

Congreso; XXIII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2006

Asociación de Biología de Tucumán

Zymomonas mobilis, bacteria gram (-),  reconocida como GRAS (Generally Regarded As Safe) produce metabolitos con  propiedades antimicrobianas, que inhiben el desarrollo de numerosos microorganismos, tanto procariotas como eucariotas, patógenos para el hombre, animales y plantas. En estudios anteriores se vio que los sobrenadantes concentrados de cultivos de Zymomonas inhibieron el desarrollo de bacterias fitopatógenas, tales como Erwinia carotovora, Pseudomonas syringae, Xanthomonas axonopodis pv. citri y Clavibacter michiganensis, como así también el de Penicillium digitatum, hongo causal de la pudrición de los cítricos durante el período poscosecha.  El objetivo de este trabajo fue determinar, mediante ensayos in vitro, el grado de inhibición de P. digitatum producido por los metabolitos de Zymomonas presentes en medio sólido, comparando su acción con la de imazalil, fungicida  empleado para su control.  Para ello, cultivos de Zymomonas, aislada de jugo de caña de azúcar en Tucumán, de 12h de crecimiento en medio estándar (MEGI) fueron centrifugados y resuspendidos en un volumen de MEGI fresco, hasta una concentración de biomasa cuantificada por determinación del peso seco (1 a 7 g/l). La suspensión de Zymomonas  así preparada se sembró sobre agar papa glucosado (APG) y se incubó 72h a 30ºC para la producción y difusión de los metabolitos (cultivo en dos fases). Al cabo de este tiempo se removió la biomasa mediante lavados sucesivos con agua destilada estéril y se eliminaron las bacterias sobrevivientes con cloroformo. Tambien se prepararon cajas de Petri con APG + imazalil (formulación comercial al 50%), en concentraciones entre 50 y 1000 ppm. Luego, en las cajas que contenían los metabolitos de la bacteria como en estas  últimas, se sembró P. digitatum mediante dos metodologías diferentes: a) colonia gigante y b) diseminación de 20 μl de una suspensión de 1x106 conidias/ ml. Los cultivos se incubaron 20 días a 30°C. El ensayo se repitió cuatro veces y en todos los casos se observó la inhibición total de P. digitatum. Estos resultados indican que de 4 a 22 mg  de células de Zymomonas produjeron una cantidad suficiente de metabolitos para ejercer un efecto fungicida sobre el hongo sembrado por los dos métodos, durante todo el tiempo que duró el ensayo. Asimismo el efecto inhibitorio producido por los metabolitos de la bacteria  fue equivalente al control ejercido por 200 ppm de imazalil. Estos resultados permiten planificar estudios para corroborar la acción in vivo de los metabolitos de Zymomonas para el control de hongos poscosecha.