Produce el bicarbonato desacople a nivel molecular entre la hidrólisis de ATP y la translocación de protones catalizadas por la H+-ATPasa reversible mitocondrial?

M. C. D’ANGELO; A. F. LODEYRO; O. A. ROVERI

Mendoza, ARGENTINA

Congreso; XXXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular; 1999

Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular

PRODUCE EL BICARBONATO UN DESACOPLE A NIVEL MOLECULAR ENTRE LA HIDRÓLISIS DE ATP Y LA TRANSLOCACION DE PROTONES CATALIZADAS POR LA H+-ATPasa REVERSIBLE MITOCONDRIAL?              Bicarbonato estimula la hidrólisis e inhibe la síntesis de ATP catalizadas por la H+-ATPasa reversible mitocondrial. Una de las hipótesis postuladas para explicar ambos efectos fue que bicarbonato actuaría a nivel de la ATPasa desacoplando las reacciones de síntesis/hidrólisis de ATP de la translocación de protones. Con el objeto de poner a prueba dicha hipótesis, se estudió el efecto del anión sobre distintas reacciones mitocondriales dependientes de energía.             La reducción de NAD por succinato (transporte reverso de electrones) impulsada por la hidrólisis de ATP fue estimulada a bajas concentraciones por bicarbonato. A [bicarbonato] > 10 mM pudo observarse una progresiva inhibición de la reacción. Una inhibición similar fue observada cuando se estudió la misma reacción impulsada por la oxidación de succinato, proceso en el cual no está involucrada la ATPasa mitocondrial.  La transhidrogenasa dependiente de energía fue inhibida solo por [bicarbonato] > 50 mM. Fueron afectadas de idéntica manera la transhidrogenasa impulsada por la hidrólisis de ATP como la impulsada por la oxidación de succinato. Por otra parte, no se observó inhibición alguna del aumento de fluorescencia (sensible a desacoplantes) del ANS inducido por la hidrólisis de ATP.             En conclusión, no hemos podido obtener ninguna evidencia de que bicarbonato provoque un desacople entre la translocación de protones y la hidrólisis de ATP a nivel de la ATPasa mitocondrial, lo cual permite en principio descartar la hipótesis más arriba mencionada. Otros sitios de acción (Complejo I y transhidrogenasa) serían los responsables de los efectos descriptos en este resumen sobre el transporte reverso de electrones y sobre la transhidrogenasa dependiente de energía.