Mecanismo de la inhibición de la síntesis de ATP por bicarbonato

ANABELLA F. LODEYRO; OSCAR A. ROVERI

La Cumbre, ARGENTINA

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 1999

Sociedad Argentina de Biofísica

MECANISMO DE LA INHIBICION DE LA SINTESIS DE ATP POR BICARBONATO .  Bicarbonato, anión activador de la hidrólisis de ATP, inhibe la síntesis de ATP catalizada por partículas submitocondriales. Ambos fenómenos (estímulo de la hidrólisis e inhibición de la síntesis de ATP) podría ser explicado si bicarbonato produjera un desacople a nivel molecular entre la reacción de hidrólisis/síntesis de ATP y la translocación de protones. Ha sido previamente informado que la reducción endergónica de NAD por succinato impulsada por la hidrólisis de ATP es inhibida de manera progresiva por concentraciones del anión mayores que 10 mM (D’Angelo, Lodeyro y Roveri, XXVII Reunión de SAB), lo cual sería coherente con la hipótesis mencionada. En esta presentación se muestran nuevos estudios realizados con el objeto de poner a prueba dicha hipótesis. El transporte reverso de electrones impulsado por la oxidación de succinato (en el cual no participa la ATPasa mitocondrial), fue inhibido de manera similar a la reacción impulsada por la hidrólisis de ATP. Este resultado sugiere que la inhibición del transporte reverso se produce de manera primaria sobre el Complejo I de la cadena respiratoria mitocondrial. Por otra parte, la reacción de intercambio  32Pi-ATP ( la cual depende de la translocación de protones impulsada por la hidrólisis de ATP) no es inhibida por bicarbonato. Por el contrario, el anión estimula la velocidad en estado estacionario (v/v0 -1 = 1.2 [bicarbonato]/( 17 mM + [bicarbonato]) y disminuye la fase de latencia de la reacción (t0 =4.4 min; t¥=2.9 min; Kbicarbonato = 13 mM). Las constantes de disociación aparentes para bicarbonato son similares a las estimadas a partir del estímulo de la actividad ATPásica  y de la inhibición (competitiva respecto de ADP) de la síntesis de ATP. Estos resultados permiten descartar que bicarbonato desacople la hidrólisis de ATP de la translocación de protones a nivel de la H+-ATPasa reversible mitocondrial. Con subsidios de CONICET.