Efecto de bicarbonato sobre reacciones mitocondriales dependientes de energía

CECILIA D’ANGELO; ANABELLA F. LODEYRO; OSCAR A. ROVERI

La Plata, ARGENTINA.

Congreso; XXVII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 1998

Sociedad Argentina de Biofísica

EFECTO DE BICARBONATO SOBRE REACCIONES MITOCONDRIALES DEPENDIENTES DE ENERGIA. Previantente ha sido observado en nuestro laboratorio que bicarbonato, anión activador de la hidrólisis de ATP, se comportó como inhibidor de la reacción inversa: la síntesis de ATP. Dicha inhibición fue estrictamente no competitiva respecto de Pi y competitiva respecto de ADP a bajas concentraciones de Pi. Con el objeto de tratar de discernir entre los distintos hipótesis planteadas para explicar la activación de la reacciosi liidrolítica y la inhibición de la reacción de síntesis de ATP por bicarbonato se decidió estudiar el efecto del mismo sobre distintas reacciones dependientes de energía catalizadas por partículas submitocondriales fosforilantes. La reducción endergónica de NAD por succinato impulsada por la hidrólisis de ATP, fue levemente estimulada a [bicarbonato] < 3 mM. Concentraciones mayores de bicarbonato produjeron una inhibición total de la reacción con un IC50 = 30 mM. La reacción fue también inhibida por NaCl si bien en este caso el IC50 > 100 mM. La transhidrogenasa dependiente de energía fue inhibida por concentraciones elevadas de bicarbonato (IC50 = 100 mM). Un efecto similar fue producido por NaCl. Si bien la inhibición producida por bicarbonato sobre la reducción endergónica de NAD por succinato impulsada por la hidrólisis de ATP sería coherente con la hipótesis de que bicarbonato produce sus efectos aumentando el deslizamiento de protones a nivel de la ATPasa mitocondrial (esto es desacoplando la hidrólisis de ATP de la translocación de protones a nivel molecular), la ausencia de efecto sobre el aumento de fluorescencia del ANS inducido por la hidrólisis de ATP y la poca sensibilidad de la transhidrogenasa dependiente de energía ponen en duda la validez de tal hipótesis.