El receptor nicotínico neuronal alfa 7 y su rol en la activació

DE ROSA, M.J.; DIONISIO, L.; BOUZAT, C.; ESANDI, M.C.

Los Cocos, Córdoba

Congreso; XXII Reunión anual de la SAN; 2007

El receptor nicotínico neuronal (nAChR) a7 está presente en linfocitos humanos, aunque poco se conoce acerca de su rol funcional y de la posible vinculación con el sistema nervioso. En el presente trabajo investigamos su participación en la activación linfocitaria. Mediante RT-PCR se detectó la presencia del ARNm de a7 en linfocitos activados por el mitógeno fitohemaglutinina (PHA). La presencia del receptor en membrana fue estudiada utilizando el ligando fluorescente a-bungarotoxina (FICT-a-BTX). La unión del ligando marcado pudo ser detectada solamente en linfocitos activados. Evaluando los cambios en la concentración de calcio intracelular ([Ca]i) mediante microscopía confocal y la sonda fluorescente fluo-3/AM, se determinó la funcionalidad de estos receptores permeables a calcio. Se comparó las oscilaciones de calcio en linfocitos activados y no activados al exponerlos a nicotina. Los linfocitos no activados no presentaron cambios en la fluorescencia cuando fueron expuestos al agonista, mientras que en células activadas se pudo determinar oscilaciones de calcio. La respuesta al agonista se observó como un incremento de la fluorescencia de alrededor de 1.5-2 veces con respecto al basal y de una duración de 5-10 s. Por último, mediante un ensayo de incorporación de H3-timidina, se estudió el efecto de nicotina y de dos antagonistas de a7 (a-BTX y metililcaconitina (MLA)) en la proliferación inducida por PHA. En presencia de los antagonistas, la activación por PHA alcanzó valores 50% superiores con respecto a los controles. En presencia de nicotina la proliferación no se ve afectada. Estos resultados sugieren que el receptor a7 modularía la proliferación linfocitaria y contribuyen a esclarecer el rol del sistema colinérgico extraneuronal en la respuesta inmune.