La activación del receptor de glucocorticoides del miocardio mejora la función mecánica post-isquémica mediante inhibición del intercambiador Na+/H+ (NHE1)

ESCUDERO DS; FANTINELLI JC; MARTÍNEZ VR; PÉREZ NG; DÍAZ RG

La Plata

Jornada; Jornadas de Investigación 2022 de la Facultad de Ciencias Médicas de La Plata, UNLP; 2022

Facultad de Ciencias Médicas de La Plata, UNLP

Introducción: Los glucocorticoides (GCs) son hormonas esteroideas que modulan diversos procesos fisiológicos incluyendo la función cardiovascular. GCs como el cortisol son capaces de activar a su propio receptor (GR) y también al receptor de mineralocorticoides (MR), muy expresados en el tejido cardíaco. Existen evidencias científicas que vinculan la activación del MR con procesos patológicos entre los que se destaca la insuficiencia cardíaca, una de cuyas características prominentes es la sobreactivación del NHE1. En contraposición, es escasa y controvertida la información disponible acerca del rol que juega la activación del GR en el miocardio.Objetivos: Evaluar posibles efectos cardioprotectores de la activación del GR a través de un agonista similar al endógeno en un modelo ex vivo de infarto agudo de miocardio.Materiales y métodos: Se utilizaron ratas Wistar macho de 5 meses de edad. Se generó infarto agudo de miocardio ex vivo en corazones aislados perfundidos mediante técnica de Langendorff provocando isquemia (I) regional por ligadura de la arteria coronaria descendente anterior del ventrículo izquierdo (VI) durante 40 min, seguido de 60 min de reperfusión (R). El protocolo se realizó en ausencia (control ?I?) o presencia de Hidrocortisona (HC, 10nM) aplicada durante los 10 primeros minutos de R, o en presencia de HC más el bloqueante del GR Mifepristona (M, 10μM) durante el mismo período de tiempo. Al finalizar la R un grupo de corazones recibió una doble tinción (Azul de Evans más Clururo de Trifeniltetrazolio) para determinar tamaño de infarto, y otro grupo fue separado para evaluar estrés oxidativo mediante determinación de especies reactivas del oxígeno (ROS) y cociente glutatión reducido/oxidado (GSH/GSSG) por fluorescencia, y mediante estimación de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) por absorbancia, como indicador de peroxidación lipídica. En otro grupo de experimentos en músculos papilares aislados del VI de corazones no isquémicos se evaluó el efecto de HC 1nM (HC1) y 10nM (HC10) sobre la actividad del NHE1. Para ello se comparó (en las distintas condiciones experimentales) la velocidad de recuperación del pH intracelular (estimado mediante fluorescencia de BCECF) luego de una carga ácida transitoria (TA) generada por pulso de cloruro de amonio en un medio libre de bicarbonato. Un grupo de tiritas de VI disecadas de los mismos corazones sometidos a estos mismos protocolos fueron usadas para determinar la fosforilación en ser648 (sitio consenso para AKT) del NHE1, para lo cual se realizó inmunoprecipitación seguida de western blot.Resultados: La HC redujo el tamaño de infarto (en % del área de riesgo: 38±3 I, vs. 9±3 HC, n=4, p