Calcio-pH-Sodio-intracelular

VILA PETROFF MF; PÉREZ NG

Introducción al análisis científico del aparato cardiovascular en bioingeniería, Parte II: Modelos Experimentales en Bioingeniería

Facultad Regional Buenos Aires, Universidad Tecnológica Nacional

Año: 2004; p. 183 - 202

  El uso de indicadores fluorescentes para la medición de concentraciones iónicas intracelulares se ha difundido en los últimos años. La característica en la cual se basa su uso para determinar la concentración de un ion, es el hecho de que la interacción entre ambos elementos determina una marcada modificación en la intensidad de fluorescencia emitida, o un desplazamiento en el espectro de excitación y/o emisión de fluorescencia. Un compuesto fluorescente es aquel que emite luz de un espectro característico (espectro de emisión), luego de haber sido excitado por la absorción de luz de una longitud de onda apropiada (espectro de excitación). Hay indicadores fluorescentes (Indo-1, Fura-2, BCECF) cuya molécula cambia su espectro de excitación al unirse al ion para el cual son específicos (ej: H+ para BCECF), mientras permanece relativamente constante la longitud de onda de la fluorescencia emitida. Esto puede determinarse midiendo la intensidad de la fluorescencia emitida al excitar el indicador con diferentes longitudes de onda, en presencia y ausencia del ion que miden. Para el caso particular de BCECF, la señal de fluorescencia disminuye durante la excitación con una longitud de onda cercana a 495 nm cuando aumenta la concentración de H+, mientras que la señal permanece relativamente constante durante la excitación con longitud de onda 440 nm.