Expresión de la proteína Rab22 en macrófagos Raw infectados por Leishmania braziliensis

CARGNELUTTI DE; TONELLI R.; CARRIZO L; SALOMON MC

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2011

Sociedad Argentina de Protozoología

Leishmania braziliensis es un protozoario intracelular que parasita macrófagos. Ingresa por endocitosis mediada por receptor y se aloja en una vacuola parasitófora que constituye una alteración en la ruta endocítica del fagocito. Las proteínas Rab son  GTPasas que actúan como potentes y específicos reguladores del tráfico intracelular; Rab22 en particular, actúa en la vía endocítica. El objetivo del presente trabajo es estudiar la expresión de la GTPasa Rab22 en células Raw infectadas con L. braziliensis a 2 y 24 horas post infección. Se infectaron macrófagos Raw con promastigotes de L. braziliensis provenientes de un cultivo de 48 horas en RPMI y se incubaron a 37ºC en 5% de CO2.  A las 2 y 24 horas post infección se lavaron las células infectadas y se procesaron para su análisis por inmunofluorescencia, usando un anticuerpo de conejo anti-Rab22 como primer anticuerpo; como segundo anticuerpo se usó un anti conejo marcado con Alexa 388. Como control de especificidad se utilizó suero de conejo.A las 2 horas post infección no se observó fluorescencia en ninguna de las muestras, mientras que a las 24 horas se observó una notoria fluorescencia de distribución perinuclear con el anticuerpo anti-Rab 22 (que no se observó en el control). Este resultado demuestra que la infección con L. braziliensis induce la expresión de Rab22 en células Raw a las 24 horas post infección, lo que permite inferir algún rol de Rab 22 en la génesis y/o el mantenimiento de la vacuola parasitófora.