EXPRESIÓN REGULADA DE SUPERÓXIDO DISMUTASA EN BACTERIAS FOTOTRÓFICAS

SANTUCCI, NATALIA; BORTOLOTTI, ANA; CORTEZ, NÉSTOR

Rosario

Congreso; VIII Congreso - XXVI Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2006

Rhodobacter Capsulatus es una bacteria fotosintética de gran versatilidad metabólica capaz de crecer tanto heterotroficamente en presencia de oxígeno, como fotoautotróficamente o fotohetrotróficamente en anaerobiosis. La síntesis de la única superóxido dismutasa (SOD) presente en esta bacteria es inducida frente al aumento de la concentración de oxígeno del medio. Con el objetivo de estudiar la regulación de esta enzima se construyeron dos vectores de expresión para el gen sod que difieren en la longitud de la región 5´. Éstos presentan 100 y 500 pb corriente arriba del sitio de inicio de la transcripción. Ambas construcciones se utilizaron para complementar una mutante insercional de R. Capsulatus en la que el gen sod ha sido interrumpido por un gen de resistencia a kanamicina. Las cepas complementadas fueron enfrentadas a agentes propagadores de superóxido y se analizó la respuesta antioxidante de las mismas. Se observó una mayor tolerancia en aquella que portaba el fragmento de mayor tamaño. También se compararon los niveles de actividad y de proteína SOD ante variaciones de las condiciones de oxigenación. Los resultados obtenidos muestran una expresión diferencial del gen, por lo que se propone la existencia de un elemento regulatorio en la región de 500 pb corriente arriba. El sistema de dos componentes RegB/RegA presente en esta bacteria, regula la transcripción de varios genes en función del metabolismo redox. Considerando la presencia de una secuencia putativa de unión al regulador RegA en la región 5´ del gen sod, analizamos los niveles de actividad de la proteína en mutantes de R. capsulatus nulas para el gen RegA bajo distintas condiciones de oxigenación. Nuestros resultados sugieren la participación del sistema RegB/RegA en la regulación de la superóxido dismutasa de R. capsulatus.