EFECTO IN VITRO DE LA LEPTINA EN LA BLASTOGENESIS ESPECFICA Y PRODUCCION DE IFNg EN TUBERCULOSIS

SANTUCCI, NATALIA; BIANCHI, ERNESTO; DÍAZ, ARIANA; BAY, MARÍA LUISA; BOTTASSO, OSCAR

Rosario

Congreso; XIII Congreso y XXXI Reunión anual de la Sociedad de Biología de Rosario 2011; 2011

La leptina, producida principalmente por los adipocitos, act¨²a a nivel del SNC reduciendo la ingesta y aumentando el consumo energ¨¦tico. Adem¨¢s, redirecciona la respuesta inmune hacia la inmunidad celular, estimula la proliferaci¨®n de las c¨¦lulas T naive e induce la producci¨®n de NO y varias citocinas pro-inflamatorias, conectando as¨ª el estado nutricional con las funciones neuroendocrinas e inmunes. La tuberculosis (TB) es la cl¨¢sica enfermedad comsumptiva: induce la p¨¦rdida progresiva de peso, pudiendo incluso culminar en caquexia. Previamente demostramos que en pacientes TB los niveles circulantes de leptina y DHEA est¨¢n disminuidos, mientras que los de adiponectina, ghrelina y cortisol se encuentran aumentados, mostrando que existe un desbalance inmunoend¨®crino que favorecer¨ªa la patolog¨ªa y el deterioro f¨ªsico del paciente. Fue nuestro objetivo investigar posibles efectos in vitro de la leptina en la blastog¨¦nesis y producci¨®n de IFN¦Ã de 6 pacientes TB as¨ª como 6 Controles sanos (Co). Para ello cultivamos C¨¦lulas Mononucleares Perif¨¦ricas (CMP) estimuladas con leptina y/o M. tuberculosis irradiado (Tso), y determinamos la respuesta proliferativa mediante la incorporaci¨®n de Timidina tritiada (1 mCi/pocillo). El tratamiento simult¨¢neo con leptina y Tso redujo significativamente la linfoproliferaci¨®n (p<0,01) tanto en CMP de TB como de Co, siendo este efecto m¨¢s pronunciado en TB (p<0.05). Adem¨¢s evaluamos la producci¨®n de IFNg intracitoplasm¨¢tico en la CMP tras 6 hs de est¨ªmulo con la hormona y/o Tso mediante citometr¨ªa de flujo, utilizando Brefeldina A como inhibidor del aparato secretor celular y anticuerpos monoclonales anti-CD3(PerCp-Cy5.5), anti-CD4(FITC), anti-CD45RO(PECy7) y anti-IFNg(PE) (Becton Dickinson). Los resultados muestran que no habr¨ªa un efecto sin¨¦rgico de la leptina y el ant¨ªgeno espec¨ªfico en la producci¨®n de IFN¦Ã. Conjuntamente podemos concluir que en TB el tratamiento in vitro con leptina no favorecer¨ªa la expansi¨®n de los clones inmunocomprometidos, si bien no modifica la s¨ªntesis de IFNg en estas c¨¦lulas