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EFECTO DEL SISTEMA DE ACTIVACIÓN DEL PLASMINÓGENO DURANTE LA MIV DE OVOCITOS BOVINOS FERRERO M, JIMÉNEZ-DIAZ M, ROLDÁN-OLARTE M, PALMA G, MICELI D. INSIBIO, Tucumán, Argentina. La investigación sobre el efecto in vitro de algunas cascadas proteolíticas en condiciones fisiológicas durante el período preovulatorio en bovinos, como puede ser el sistema de activación del plasminógeno, mejoraría la maduración in vitro (MIV), además permitiría conocer algunas de las causas que provocan la baja eficiencia del cultivo de embriones, a fin de incrementar el rendimiento de los sistemas actuales de producción in vitro de embriones bovinos. El objetivo consistió en estudiar la participación del sistema de activación del plasminógeno (Plg) en la MIV de ovocitos bovinos. Se localizó al Plg en el gameto femenino, se valoró el efecto de un inhibidor de la actividad de plasmina (ácido έ-amino caproico, EACA) y de un activador exógeno del Plg (estreptoquinasa, SK), sobre diferentes parámetros relacionados con la MIV. Las variables estudiadas en los distintos grupos experimentales fueron la expansión del cúmulo, la disgregación de las células del cúmulo (CCs), el porcentaje de ovocitos con primer cuerpo polar y la resistencia de la zona pelúcida (ZP) a la digestión con pronasa al 0,4%. Se utilizaron ovocitos bovinos inmaduros y se maduraron in vitro en un medio libre de suero en presencia de EACA o SK. En todas las experiencias las drogas se adicionaron al inicio o al inicio y mitad del proceso y los resultados se evaluaron finalizada la MIV. Mediante inmunofluorescencia indirecta localizamos al Plg en la ZP, espacio perivitelino y CCs de ovocitos inmaduros y en la membrana plasmática en los madurados in vitro. La presencia de EACA (100 mM) en el medio de maduración inhibió la expansión del cúmulo y disminuyó la disgregación de las CCs. Se observó un porcentaje inferior al control, de ovocitos con primer cuerpo polar, posiblemente debido a un retardo en la expulsión del mismo. Se comprobó que el EACA no afectó la viabilidad de los ovocitos madurados in vitro ya que los mismos continuaron su desarrollo embrionario luego de ser fecundados. La MIV en presencia de SK (35x10-3 UI/L) aumentó el porcentaje de ovocitos maduros con expansión y/o disgregación de las CCs e incrementó significativamente el porcentaje de ovocitos con primer cuerpo polar. Al parecer la formación de plasmina, por la activación del Plg con SK, actuaría degradando la matriz extracelular de las CCs incrementando la disgregación de las mismas, lo que a su vez favorecería la expulsión del primer polocito observándose un mayor porcentaje de ovocitos maduros. En las condiciones de nuestros ensayos la SK no afectó el tiempo de disolución de la ZP, mientras que el inhibidor de plasmina produjo un endurecimiento.

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