El inhibidor de la traducción Me31B interactúa diferencialmente con las isoformas de eIF4E en Drosophila melanogaster

VILARDO E; CORUJO GH; GRECO H; RIVERA POMAR R; LAYANA C

Chascomus

Taller; III Taller de Biología Celular y del desarrollo; 2016

El desarrollo de todos los organismos implica una regulación global de la expresión de los genes a distintos niveles. En los eucariotas, la regulación a nivel de la traducción es muy importante, sobre todo en el inicio; la iniciación está regulada por proteínas de unión al factor de iniciación eIF4E. En Drosophila melanogaster (Dm) existen 8 isoformas para eIF4E, sin embargo su función biológica aún no ha sido caracterizada, excepto para eIF4E-1, eIF4E-3 y 4E-HP. En ovarios eIF4E-1 junto con Me31B (homólogo de la RNA helicasa Rck/p54) y CUP silencian el mensajero de oskar y regulan el proceso de oogenesis. En gránulos citoplasmáticos, Me31B, es requerido para el silenciamiento de los mensajeros celulares. De manera similar, durante el desarrollo de la línea germinal del macho se requiere el factor eIF4E-3 para la correcta segregación de cromosomas, citoquinesis y la diferenciación espermática. Resultados previos de nuestro grupo indican que Me31B interactúa con eIF4E (doble híbrido y FRET) tanto con la isoforma 1 como con la 3. Analizando la ubicación de Me31B en testículos por inmunohistoquímica demostramos su localización en gránulos compartidos con eIF4E-3 en un patrón similar a lo observado en ovarios con eIF4E-1. Aquí analizamos mediante mutaciones sitio dirigidas de Me31B el sitio de interacción con las eIF4Es, las interacciones fueron analizadas mediante la técnica de doble híbrido en levaduras. Los resultados indicaron que el sitio de interacción de Me31B con eIF4E-1 es distinto del de interacción con eIF4E-3, esto indicaría una regulación diferencial y tejido específica en la línea germinal del macho y de la hembra. Asimismo generamos moscas mutantes de Me31B en los sitios de interacción mediante la técnica de CRISPR para evaluar el efecto en la espermatogénesis en las moscas adultas. Nuestros resultados sugieren que el desarrollo de la línea germinal requiere el silenciamiento de mensajeros mediado por la interacción de factores específicos según se trate de la hembra o el macho, mediante sitios diferenciales de interacción.