Estudio in vitro de la respuesta inmune innata en celulas bovinas infectadas con Staphylococcuaaures en modo de vida libre y en biopelícula

BOHL LP; SANTONI LN; ISAAC P; BRESER ML; CONESA A; ORELLANO MS; CORREA SG; TOLOSA DE TALAMONI N; PORPORATTO C

Salta

Congreso; XI Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria (AAIV; 2018

Asociación Argentina de Medicina Veterinaria

La mastitis bovina es la inflamación de la glándula mamaria,principalmente como consecuencia de una infecciónbacteriana. Esta patología presenta alta incidencia en todo elmundo, siendo difícil de controlar y regenerando importantespérdidas económicas para el sector lácteo. La formación debiopelículas (o biofilm) se considera una ventaja selectivapara los patógenos y ha sido asociada con la persistenciabacteriana en la ubre, la recurrencia de la enfermedad,el aumento de la resistencia a los antimicrobianos y laevasión a la respuesta inmune del huésped. Este modode crecimiento de la bacteria ha cambiado la forma en quese estudian las interacciones entre los patógenos y lascélulas huésped en el laboratorio. Por ello, el objetivo deeste trabajo fue estudiar la respuesta inmune innata in vitrode células bovinas infectadas con Staphylococcus aureusen modos de vida libre (planctónico) y en biofilm. Se utilizóla cepa formadora de biofilm S. aureus V329 (aislada demastitis subclínica), una mutante biofilm negativa (S. aureusV329 Äbap Äica) y las líneas celulares bovinas MAC-T(epiteliales de glándula mamaria) y BoMac (macrófagos). Enprimer lugar, se determinó la invasión bacteriana medianteel ensayo de exclusión con gentamicina, implementandotres metodologías experimentales que difieren en el modode representar las biopelículas. Luego, se eligió una de lasmetodologías y se aplicó para el estudio de la expresión delreceptor de reconocimiento tipo Toll (TLR) 2 por citometríade flujo, la producción de citoquinas IL1α e IL6 medianteELISA y la expresión génica de IL1α, IL6, IL8, TNFα yNFkB por retrotranscripción seguida de reacción en cadenade la polimerasa en tiempo real. El análisis estadísticode los datos se realizó con test t, ANOVA o KruskalWallis (*p