Respuesta inflamatoria inducida por veneno a B. Jararacussu en macrofagos murinos de linea celular RAW

SOTO DE FERRINI S ; MARUÑAK S; BRESER ML; RODRÍGUEZ JP; ACOSTA O; LEIVA L; RIVERO VE

La Falda, Córdoba.

Congreso; LVI Reunión Anual de la SAI -XI Jornada Cientifica del Grupo Rioplatense de Citometria de Flujo; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

En Argentina el género Bothrops es el responsable de la mayoría de los accidentes ofídicos, ocacionando hemorragias, disturbios de la hemostasia y perturbaciones hemodinámicas. En la terapéutica de ésta intoxicación el uso de suero antiofidico y la consecuente neutralización de los efectos deletéreos del veneno en los tejidos, no es suficiente: se busca además reducir la importante inflamación producida. El objetivo del presente trabajo fue analizar mediadores inflamatorios generados al estimular células macrofágicas de la linea RAW 264.7 con veneno d B. Jararacussu. Para ello macrófagos murinos de la linea RAW 264.7, fueron incubados con dosis sub-citoxicas de veneno y se analizó la actividad arginasa (producción de urea), secreción de Oxido Nitrico (tecnica Griess) y citoquinas inflamatorias como IL-6 y TNFa (ELISA) en sobrenadantes de cultivo; expresión de RNAm para citoquinas y quimiocinas por RT-PCR y de moléculas CMH II y co-estimulatorias CD80por IF. Los resultados obtenidos al incubar células RAW 264.7 con distintas concentraciones de veneno demostraron un incremento en la producción de ON y una disminución en la producción de urea en la relación a los valores hallados al incubar las células solo con medio. Células RAW incubadas con venenos incrementaron notoriamente la expresión de RNAm para IL-6, IL1b y levemente para TNFacomparado con los expresados con las células incubadas solo con medio. Los sobrenadantes de cultivos de células RAW incubadas con veneno aumentaron significativamente los niveles de IL-6 pero levemente los de TNFa. La incubación de células RAW con veneno aunmentó la expresión de RNAm para CCL2, CCL3,CCL5 y CXCL10 comparados con los niveles expresados por las células incubadas solo con medio. Células RAW incubadas con veneno incrementaron la expresión de moléculas CMH II y co-estimulatoria CD80. Los resultados demuestran que el veneno de B. Jararacussu, in Vitro, y a concentraciones sub-citotoxicas, es capaz de estimular células de la linea RAW, produciendo mediadores que podrían estar realcionados con el importante infiltrado inflamatorio observado en este envenenamiento. Se concluye que el veneno de B. Jararacussu tiene un alto impacto en la respuesta inmune innata, induciendo la expresión de diversos mediadores inflamatorios, los cuales se vuelven blancos potenciales de estudio en busca de minimizar la respuesta inflamatoria característica de estas intoxicaciones.