?Evaluación del efecto de calcitriol en la interacción de líneas celulares bovinas y patógenos aislados de mastitis

BOHL LP; ISAAC P; BRESER ML; CONESA A; SCANDOLO L; TIRABOSCHI G; ANGIOLINI V; BOSCO C; QUIÑONEZ H

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Jornada; XIII JORNADAS DE INVESTIGACIÓN; 2021

Universidad Nacional de Villa Maria

La mastitis bovina es la inflamación de la glándula mamaria del ganado lechero, causadaprincipalmente por infecciones bacterianas. Actualmente los antibióticos son la estrategiaterapéutica más utilizada por los médicos veterinarios para tratar esta infección de granimpacto en la economía regional. Además, los antibióticos se usan con fines profilácticosdurante el secado de los animales favoreciendo la selección de cepas resistentes. Otroaspecto desfavorable es la acumulación de residuos de antibióticos en leche y en animalesde consumo humano. Por ello, urge desarrollar tratamientos profilácticos y/o terapéuticosalternativos a los antibióticos que puedan aplicarse en animales productores de alimentos.Considerando las acciones de la vitamina D en el sistema inmunitario, el objetivo fueestudiar los efectos del calcitriol (o 1,25(OH)2D3, forma activa de la vitamina D) sobreStaphylococcus spp., células bovinas y su interacción. Hipotetizamos que tratamientos con1,25(OH)2D3 estimulan la producción de péptidos antimicrobianos (PAs) en células bovinasy la fagocitosis por células inmunes. Se trabajó con cepas bacterianas formadoras de biofilmaisladas de mastitis: S. aureus V329, S. xylosus 4913, S. chromogenes 40 y S. haemolyticus6. Se utilizaron las líneas celulares bovinas MAC-T, de epitelio alveolar mamario, y BoMac,derivada de macrófagos. Se analizó la biomasa bacteriana luego del tratamiento concalcitriol (25, 50, 100 y 200 nM, 24 hs de tratamiento) mediante espectrofotometría (620nm). La citotoxicidad del 1,25(OH)2D3 se evaluó mediante la técnica de MTT en las célulasbovinas (25, 50, 100 y 200 nM, 24 y 72 hs de tratamiento). La expresión génica relativa delos PAs Lingual (LAP) y Traqueal (TAP) se estudió en las células MAC-T y BoMac tratadascon calcitriol (50 o 100 nM, 24 hs) mediante transcripción reversa seguida de PCR en tiemporeal. El efecto de la vitamina D (25 y 50 nM) sobre la fagocitosis de patógenos por las BoMacse estudió mediante el ensayo de protección con gentamicina. El análisis estadístico de losdatos se realizó mediante ANOVA/Bonferroni (diferencias significativas p