INVESTIGADORES
BRESER Maria Laura
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación in vivo de una nueva terapia para el tratamiento de vacas lecheras durante el periodo de secado
Autor/es:
BRESER ML; RAMPONE A; SAMBUCETTI N; BIANCO ID; MAINO J; TISERA L; PERALTA G; MONTENEGRO MP; TAGLIAFERRO R
Lugar:
Virtual
Reunión:
Jornada; XIII JORNADAS DE INVESTIGACIÓN; 2021
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Villa Maria
Resumen:
La inflamación de la glándula mamaria o mastitis bovina asociada a infecciones bacterianas, es la patología de mayor incidencia dentro de la actividad lechera y uno de los limitantes sanitarios y económicos más importantes de la actividad. A pesar de todos los esfuerzos tendientes a controlarla, esta patología continúa siendo un gran problema para industria láctea Argentina y el mundo. Los planes sanitarios actuales para control y tratamiento, están basados en programas de higiene, terapia antibiótica y descarte de animales con infecciones intramamarias crónicas. Si bien, la terapia antibiótica es el principal tratamiento para eliminar este tipo de infecciones, las tasas de cura van en descenso, ocasionando persistencia del patógeno y predisponiendo a la resistencia antibiótica. Las bacterias del género Staphylococcus son los patógenos encontrados con mayor frecuencia en infecciones intramamarias. La terapia antibiótica es el principal tratamiento para eliminar este tipo de infecciones. Sin embargo, las tasas de cura van en descenso, ocasionando persistencia de los microorganismos y predisponiendo a la resistencia antibiótica. La terapia antibiótica profiláctica de secado, es la estrategia que presenta las mejores tasas de cura frente a infecciones provenientes de la lactancia previa y previene nuevas infecciones en el posparto, aunque las tasas de cura clínica (TCC) no superan el 60%. En estudios previos realizados en el laboratorio, se ha demostrado que hidrogeles combinados de quitosano (Qs) y cloxacilina (Clx) mejoran de manera significativa las tasas de eficacia de los componentes individuales en bacterias crecidas en diferentes formas de vida (cultivos planctónicos, biofilms preestablecidos e invasiones intracelulares). Se trabajó en el desarrollo de diferentes formulaciones finales de los hidrogeles combinados de Qs y Clx, utilizando diferentes bases y consistencias con el fin de obtener un producto final que preserve la actividad de los principios activos y logre las características físico-químicas necesarias para desarrollar el pomo. Una vez seleccionada la formulación de hidrogel combinado final con las características buscadas, se realizó un escalado de producción para su evaluación in vivo en animales de producción.De acuerdo a los resultados obtenidos in vitro se desarrolló una formulación final del hidrogel combinado (Qs y Clx [600mg]). En base a esto, se propuso evaluar in vivo las TCC y TCB del hidrogel combinado (n=10) en comparación con el pomo comercial líder del mercado que utiliza la misma concentración de Clx(ORBENIN EXTRA DRY [Clx600mg]) (n=11) en animales de producción. Los ensayos fueron llevados a cabo en el establecimiento productivo La Cenobia SRL con excelente predisposición de la gerencia y personal. Con el objetivo de evaluar la eficacia in vivo de los diferentes tratamientos, se tomaron muestras de leche de cada cuarto en condiciones asépticas para realizar el recuento de células somáticas (RCS) y análisis microbiológico, las cuales fueron derivadas al laboratorio de análisis veterinario LABVIMA SA. Las muestras fueron tomadas de manera previa a la administración de los pomos (al secado), y en diferentes intervalos de tiempo al posparto. Para llevar a cabo el RCS se analizaron 4 intervalos de tiempo 2-7, 9-14, 16-21 y 22-28 días posparto (dpp), mientras que para realizar los análisis microbiológicos se analizaron en 2 intervalos de tiempo al posparto 2-7 y 9-14 dpp. Las TCC fueron evaluadas en función del RCS previas al secado y posterior al parto, utilizando el valor internacional de 200.000 cel/ml como límite de corte. Se consideró cura clínica cuando el cuarto presentaba un RCS> 200.000 cel/ml al secado y RCS≤ 200.000 cel/ml a cada uno de los tiempos del posparto, se considera no curado cuando se encontró RCS>200.000 cel/ml secado y un RCS> 200.000 cel/ml a cada uno de los tiempos del posparto, mientras que se consideraron nuevas infecciones cuando se encontró un RCS200.000 cel/ml a cada uno de los tiempos del posparto. Por otro lado las TCB fueron obtenidas de acuerdo a los resultados obtenidos de los análisis microbiológicos en medios selectivos, protocolo estandarizado. Se consideró cura bacteriológica cuando se encontró aislamiento bacteriano al secado y ausencia a los diferentes tiempos del posparto, se consideró cuarto no curado cuando se encontró aislamiento al secado y a los diferentes tiempos del posparto, mientras que se consideró una nueva infección cuando el cuarto no presentó aislamiento al secado y aislamiento positivo al posparto. Mediante el RCS, se observó que el hidrogel combinado mejora de manera significativa las TCC en comparación con el pomo comercial a los 16-21 y 22-28 dpp. Cuando se analizaron las muestras de leche por siembra en cultivos selectivos, se observó que las TCB obtenidas para el hidrogel combinado fueron mayores que las obtenidas con el pomo comercial 64,7% y 37,5% respectivamente. De acuerdo a los datos obtenidos, se ha observado que la mejora en la TCB, está principalmente asociada al importante efecto antimicrobiano que tiene el hidrogel combinado sobre bacterias del género Staphylococcus (75%) en comparación con el pomo comercial (27,5%). Las TCB del hidrogel combinado y el pomo comercial no muestran diferencias de eficacia sobre bacterias del género Streptococcus(62,5% y 60%), ni sobre la tasa incidencia a nuevas infecciones (35,2% y 38,3%). Estos primeros resultados obtenidos indican que el hidrogel combinado presenta una importante TCB en comparación con el pomo líder del mercado, este efecto principalmente asociado al importante efecto antimicrobiano asociado a bacterias del género Staphylococcus. Los datos obtenidos hasta el momento muestran que el hidrogel combinado podría ser una nueva estrategia para el control y tratamiento de infecciones intramamarias que podría actuar de manera eficiente sobre los principales patógenos relacionado a la prevalencia de mastitis, permitiendo así reducir los tratamientos asociados al control de esta patología.