Estudio de diversidad genética de Escherichia coli O157:H7 aisladas de niños con diarrea aguda de la infancia mediante el método de MLVA

RIVERO, M. BUSTAMANTE, A. V., SANSO, A. M. & PARMA, A. E

Rosario

Jornada; XIII Jornadas Argentinas de Microbiología; 2008

Asociación Argentina de Microbiología

Escherichia coli O157:H7 es uno de los más importantes agentes etiológicos del Sínndrome Urémico Hemolítico (SUH), principal causa de insuficiencia renal aguda y segunda causa de insuficiencia renal crónica en la infancia. El método de análisis de múltiples loci VNTRs (MLVA) ha sido recientemente implementado en nuestro laboratorio para la tipificación específica de aislamientos O157:H7. El objetivo de nuestro trabajo fue estudiar la diversidad genética existente entre cepas de Escherichia coli O157:H7 aisladas de muestras de materia fecal de niños con diarrea aguda de la infancia. Se estudiaron 13 cepas de Escherichia coli O157:H7 provenientes de materia fecal de niños que presentaron diarrea acuosa, sanguinolenta, mucosanguinolenta y/o SUH oriundos de Tandil, Benito Juárez, Napaleofú y Vela, no pertenecientes a un único brote de enfermedad. Las cepas fueron aisladas y caracterizadas para sus principales factores de virulencia (vt1, vt2, eae, ehxA y saa). Para la realización del método de MLVA se amplificaron por PCR 9 loci VNTR. Los amplímeros se visualizaron en geles desnaturalizantes de poliacrilamida, teñidos con sales de plata. Los resultados indicaron una buena eficiencia en la amplificación de los 9 loci. Seis de ellos se amplificaron en dos reacciones múltiples y otros tres, en reacciones simples. Todos los loci fueron polimórficos, mostrando de 3 a 7 alelos, con un promedio de 5 alelos por locus. El índice de diversidad genética (D) varió entre 49 y 83%. Se observaron un total de de 13 haplotipos, uno para cada muestra analizada. El análisis de agrupamiento por UPGMA mostró que las asociaciones entre los aislamientos se deben al azar y no al origen de las muestras reflejando la diversidad genética en muestras provenientes de casos esporádicos de infecciones por O157:H7 pertenecientes a una misma región geográfica, socioeconómica y cultural. Esta variabilidad podría deberse a que existe diversidad en el origen de la fuente de infección, llevando esto a una mayor dificultad para la implementación de medidas de control.