Estudio electroquimico de la interacción de un cudruplex de guanina y azure B

HAJRA BASIT, VICTORIA BRACAMONTE, PIERRE LABBÉ, GUSTAVO RIVAS, NANCY F. FERREYRA

Córdoba

Congreso; XVII Congreso Argentino de Físico Química y Química Inorgánica; 2011

AAIFQ

En este trabajo se estudió la interacción de una secuencia de ADN denominada G-cuadruplex y el intercador Azure B (AzB). Dicha secuencia posee una estructura constituida por cuatro hebras paralelas de guaninas, esta estructura tan particular ha sido identificada en la formación de telómeros y de promotores oncogénicos. Por tal motivo, la estabilización o inducción de la formación del cuadruplex de guanina se estudia actualmente como una vía promisoria para limitar el crecimiento de las células cancerosas. Para los estudios realizados se empleó la secuencia químicamente modificada con un ciclodecapéptido y una biotina terminal, como se muestra en la siguiente figura. La secuencia fue inmovilizada sobre la superficie de electrodos de oro modificados con ácido 3-mercapto propanoico. Los grupos carboxílicos del tiol fueron unidos a las funciones amina de streptavidina (SA) empleando 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil) carbodiimida) (EDC) y N-hidroxisuccinimida (NHS). La adsorción de G-cuadruplex sobre los electrodos previamente modificados se basó en la interacción específica streptavidina/biotina-G-cuadruplex. Mediante Resonancia de Plasmón Superficial (SPR) “in situ” se estudiaron: todas las etapas de modificación de los electrodos, la interacción entre G-quadruplex y AzB, la regeneración de la superficie post interacción empleando diferentes protocolos, y la interacción inespecífica entre la superficie del electrodo y el intercalador, en este caso siguiendo la interacción entre SA sin G-cuadruplex y AzB. La interacción G-cuadruplex-AzB fue estudiada electroquímicamente siguiendo los cambios en la señal de reducción del intercalador a -0,2 V obtenida por voltamperometría de onda cuadrada o voltamperometría cíclica. Se realizó un análisis comparativo de la respuesta de AzB sobre oro sin modificar, oro modificado sólo con SA y oro modificado con G-cuadruplex. Los resultados indican que AzB interactúa con G-cuadruplex, la adsorción puede ser descripta con una isoterma tipo Langmuir, en acuerdo con estudios previos realizados por SPR, alcanzándose la saturación superficial en concentraciones mayores a 3 μM. El presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas exitosamente en el estudio de este tipo de interacciones obteniéndose resultados comparativos a los de otras técnicas de mayor complejidad. presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas exitosamente en el estudio de este tipo de interacciones obteniéndose resultados comparativos a los de otras técnicas de mayor complejidad. μM. El presente trabajo muestra que las técnicas electroquímicas pueden ser empleadas exitosamente en el estudio de este tipo de interacciones obteniéndose resultados comparativos a los de otras técnicas de mayor complejidad.