Estudio de la Interacción de ADN y Amitrol

MARÍA L. PEDANO, NANCY F. FERREYRA, ALBERTO SÁNCHEZ, MANUEL CHICHARRO, GUSTAVO A. RIVAS.

Merlo, Argentina

Congreso; III Congreso Argentino Química Analítica,; 2005

Con el incremento en el uso de productos agroquímicos a gran escala, surgió la necesidad de contar con métodos rápidos y sensibles para su determinación, ya que en muchos casos se ha demostrado su actividad carcinogénica y su acción contaminante. Un ejemplo de este hecho es el amitrol (3-amino-1, 2, 4-triazol o aminotriazol), pesticida muy conocido de baja volatilidad (pe = 260◦C) y alta solubilidad (280 g L−1), características que lo hacen un potente contaminante de alimentos y agua. Su actividad carcinogénica ha sido determinada en animales y por esta razón se ha prohibido su uso como pesticida. La detección de amitrol y el estudio de su interacción con ADN es,  por lo tanto, muy importante para la medicina y el monitoreo ambiental.  En el presente trabajo se estudió la interacción de amitrol con ADN de doble hebra, tanto en solución como previamente adsorbido sobre sustratos sólidos con vistas al desarrollo de biosensores que puedan ser empleados como herramientas para muestreo. Se emplearon técnicas espectroscópicas (espectroscopía UV-Visible) y electroquímicas (voltametría cíclica y de onda cuadrada, y “stripping” potenciométrico a corriente constante). Los soportes utilizados fueron cuarzo, para los estudios ópticos, y un compósito de grafito/aceite mineral 60/40 % P/P, para las medidas electroquímicas. En las medidas espectrofotométricas se evaluó la evolución de la señal de ADN con el tiempo de interacción con amitrol en soluciones mezclas de diferente composición. Por otro lado se estudió también dicha interacción con el ADN previamente adsorbido sobre cuarzo. En las medidas electroquímicas se emplearon dos estrategias según se estudiara la interacción en la superficie o en solución. Para investigar la interacción en solución, se prepararon mezclas de amitrol y ADN de diferente composición y posteriormente se adsorbió el aducto formado a  potencial controlado sobre la superficie del electrodo. Para los estudios de la interacción en superficie, se depositó ADN sobre el electrodo a potencial y tiempo controlados, luego se efectuó la interacción con amitrol y finalmente se evaluaron las señales electroquímicas resultantes en solución de electrolito soporte. En ambos casos  se empleó como señal analítica el pico correspondiente a la oxidación de guanina a 1,050 V. Dentro de las variables que podrían condicionar el proceso de interacción se estudió el efecto del pH de las soluciones, del tiempo y potencial de interacción, así como de las concentraciones de amitrol y ADN. La interacción de amitrol con ADN resultó en una disminución de la señal de guanina poniendo en evidencia el daño producido. Los resultados obtenidos son promisorios para el desarrollo de un biosensor como herramienta de muestreo.