Mejoramiento de micoinsecticidas y parámetros indicadores

N. PEDRINI; R. CRESPO; F. TAROCCO; M. P. JUÁREZ

Buenos Aires

Congreso; V Congreso Argentino de Entomología; 2002

Cepas de hongos entomopatógenos son capaces de utilizar como única fuente de carbono a los hidrocarburos cuticulares de su insecto hospedador. La ruta de degradación sería iniciada por una reacción de oxidación terminal, hemos demostrado previamente que los productos de la misma son degradados vía b-oxidación para proveer las unidades de acetil-CoA necesarias para la síntesis lipídica, tambien liberan ácido acético y CO2 (Mycologia 92: 528-536, 2000). Nuestro objetivo fue optimizar el contacto patógeno-hospedador reduciendo el tiempo de penetración mediante un incremento de la capacidad de degradación de los hidrocarburos cuticulares de insecto, por modificación de la actividad de enzimas fúngicas inducibles involucradas en el catabolismo de alcanos. Se utilizaron cepas de Beauveria bassiana (Bals), Vuill virulentas a Triatoma infestans (Klug) (Heteroptera:Reduviidae). El catabolismo de [14C] n-alcano se midió empleando precursores radiactivos y analizando los productos de degradación mediante técnicas de radiocromatografía en placa delgada (radio TLC).  Se comparó la actividad de catalasa (enzima marcadora de proliferación peroxisomal), en cepas control y modificadas. Las medidas se efectuaron en homogenato, en pellet de 20.000g y de 100.000g obtenidos por ultracentrifugación. Se midió la cinética de degradación del H2O2 (sustrato de la catalasa) a 240 nm, por espectrofotometría. Se observa un aumento de actividad de la catalasa en homogenatos de cepas modificadas, la mayor actividad estaría asociada a peroxisomas de nueva generación. Se evaluó la mortalidad de T. infestans, por acción de cepas control y modificadas empleando técnicas de inmersión, microscopio óptico para el recuento de los conidios y análisis estadístico de los resultados obtenidos. Se observó una disminución del 30-40% en el tiempo de mortalidad de los insectos tratados con las cepas modificadas. El tiempo de germinación de los conidios crecidos en medio rico en hidrocarburos disminuyó coincidentemente.