Determinación de la conformación espacial de polielectrolitos marcados con sondas fotocrómicas por superresolución.

ARAOZ, BEATRIZ; DI PAOLO, MATIAS; BOSSI, MARIANO L.

Congreso; XIX Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica.; 2015

AAIFQ

Los polielectrolitos son macromoléculas que contienen un alto número de grupos funcionales cargados, que pueden ser funcionalizados con sondas fotoquímicamente activas para conferirle propiedades adicionales. Son utilizados para la preparación de autoensamblados capa por capa para la preparación de superficies inteligentes. La conformación que adoptan las cadenas de polímero modifica las propiedades de dichas estructuras e impacta directamente en su función y utilidad. El tamaño nanoscópico de las cadenas, 50 nm−300 nm, limita su observación directa por técnicas de microscopía óptica convencionales. Esta restricción puede ser superada por medio de técnicas de microscopía de fluorescencia de superresolución (SR), que permiten resolver objetos más allá del límite de difracción por medio del control temporal del encendido y apagado de la emisión de una sonda fluorescente utilizando dos estados de la misma. Esto posibilita discriminar los objetos cercanos alcanzando resoluciones espaciales entre 10−40 nm.En este trabajo se marcaron covalentemente polielectrolitos: ácido poliacrílico, PAA, de Mw = 100.000 y de Mw = 900.000, con un fotocrómico fluorescente basado en un colorante xanténico (amida de rodamina) obtenido por modificación de Rodamina 6G, caracterizados espectrofotométricamente y por RMN. Se estudió el comportamiento fotofísico de la sonda libre y en el polímero por medio de la adquisición de secuencias de imágenes en un microscopio de campo amplio con una CCD en la detección. Se fotoactivó la sonda a 355 nm/405 nm y se excitó a 532 nm. Se analizaron las trazas temporales de la emisión de las moléculas de colorante en función a la potencia del laser de fotoactivación, obteniendo información del tiempo de encendido y del número de fotones. Se obtuvieron imágenes de SR de las cadenas aisladas de PAA marcadas embebidas en dos sistemas: PAA sin marcar y en un autoensamblado de PAA y poliarilamina, PAH (Mw = 56.000).