Stents degradables de Fe: Importancia del pH y los productos de degradación insolubles en la evaluación de la citotoxicidad

FAGALI NS; GRILLO CA; PUNTARULO S; FERNÁNDEZ LORENZO MA

Buenos Aires

Encuentro; Fenómenos Ambientales y su Relación con el Estrés Oxidativo y Nitrosativo en Sistemas Biológicos?. IV Encuentro Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular (IBIMOL), FFyB, UBA; 2014

Instituto de Bioquímica y Medicina Molecular (IBIMOL)

El Fe puro y algunas de sus aleaciones se han propuesto para la fabricación de stents temporales biodegradables dada su susceptibilidad a una rápida corrosión en medios biológicos. Sin embargo, la disolución del stent podría originar efectos colaterales en las células aledañas al implante tales como estrés oxidativo, inflamación, etc. Los mecanismos por los que estos procesos se llevan a cabo aún no están suficientemente dilucidados dado que la evaluación in vivo en la zona del implante resulta compleja. El objetivo de este trabajo fue determinar la importancia de los iones Fe3+ solubles liberados, los cambios de pH y los productos insolubles de la degradación en la evaluación de la citotoxicidad de estos biomateriales .Para evaluar el efecto de Fe liberado, se incubaron células CHO-K1 con medio de cultivo (MC) suplementado con diferentes concentraciones de sal de Fe3+ (FeCl3.6H2O; 1-5 mM) cuyos pH variaron entre 8,4 y 5,6. El efecto de pH se determinó empleando MC con pHs ajustados a los obtenidos a las distintas concentraciones de sal de Fe3+. Se determinaron la actividad mitocondrial (MTT), el daño oxidativo a lípidos (TBARS), la concentración de Fe soluble en MC y el contenido de Fe intracelular (métodos colorimétricos).En la evaluación de ambos efectos (Fe y pH) se observó que la actividad mitocondrial fue menor que la de las células control en todo el rango estudiado. En el rango 1-2 mM de Fe3+, la disminución de la actividad se atribuyó exclusivamente al descenso de pH. Mientras que en el rango 3-4 mM, hay formación de precipitados y el efecto deletéreo debido al Fe3+ fue mayor que el causado sólo por el pH. En presencia de Fe, se determinó mayor producción de TBARS que en las células control para todo el rango estudiado, que fue independiente de los cambios de pH. Tanto la disminución en la actividad mitocondrial como el aumento en la producción de TBARS parecen estar asociados al contenido de Fe intracelular más que a la concentración de Fe soluble en el MC. Por otro lado, los resultados mostraron que el mecanismo y velocidad de degradación dependen fuertemente de la relación Fe/proteínas en el medio. La biocompatibilidad de materiales degradables en base a Fe no sólo depende de los iones Fe3+ liberados solubles sino también de los cambios de pH producidos durante la degradación y la formación de productos insolubles en la interfase Fe/células.