Estudio comparativo de técnicas de ientificación de microplasmas bucales a partir de placa subgingival

ROSMINO F.; ALMIRON, MARTA; VILLOTA S.; PALACIOS N.; SOMAGLIA L.; GALLI F.; BONTA H.; CARIDE F.; MOLGATINI S.; TURCOT L.

San Nicolás

Congreso; 50° Reunión Científica Anual SAIO; 2017

Sociedad Argentina de Investigación Odontológica

RESUMEN: OBJETIVO: Comparar las técnicas de identificación de micoplasmas por aislamiento en medios de cultivos y por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de placa subgingival de sitios periodontales. METODOS: la muestra correspondió a placa subgingival de 44 sitios periodontales con profundidades al sondaje entre 1 y 12 mm agrupadas en tres categorías (1-3mm, 4-6mm y 7-12mm). Las muestras se recolectaron por medio de conos de papel absorbentes, se colocaron en 1,2 ml de medio PPLO sin suplementos y se procesaron dentro de la primera hora de realizada la toma de material. Para los aislamientos de Mycoplas! ma spp.se cultivaron las muestras en caldo y agar PPLO suplementados con suero equino y extracto de levadura y se incubaron en una atmósfera de 90% de H 2 y 10% de CO2 a 37º C. durante 5 días. Para la detección de Mycoplasma spp. por PCR se obtuvo de cada muestra en forma independiente el ADN genómico por extracción en columna de afinidad. La detección a nivel de género de Mycoplasma se realizó a partir de 100 ng de ADN por PCR de punto final cion cebadores específicos que amplifican una región que codifica para el ARN ribosomal 16S. Los productos de amplificación se separaron por electroforesis en geles de agarosa al 1.5 % en buffer 1xTAE pH8, se colorearon con Gelgreen y se observaron bajo luz UV con el documentador de geles Geldoc de Bio-Rad. El análisis estadístico se realizó mediante el test de Fisher. RESULTADOS: De las 4 4 muestras de placa subgingival estudiadas se identificó M! ycoplasma spp por la técnica de aislamiento en medios de cultivo en 5 de ella (11,4%) y por PCR se obtuvieron en 39 identificaciones positivas (88,6 %). El análisis estadístico mostró una diferencia significativa entre ambos grupos (p < 0.0001). CONCLUSION: La técnica de PCR permitió identificar significativamente una mayor cantidad de placas subgingivales colonizadas por Mycoplasma spp. que el método de aislamiento por cultivo. UBACyT 20720150200011BA Financiamiento: UBACyT 20720150200011BA Conflictos de Intereses: no Declaració evaluación comisión etica: Si Numero de Resolución: Comisión de Ética FOUBA Res N° 0021/2015